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细胞粘附分子的检测

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  白细胞和血管内皮细胞、巨噬细胞和上皮细胞等以及血液中均存在细胞粘附分子。按其结构特1瀀,分有钙离子依赖性家族、整合素家族、免疫球蛋白超家族和选择素家族四大类。在各种细胞因子、内毒素、凝血酶等作用下,细胞粘附分子由细胞内贮存池转移至细胞膜或合成增加,导致细胞表面的粘附分子数量增多。因此在某些疾病中细胞粘附分子的数量有改变。此外,细胞粘附分子经磷酸化、糖基化等修饰作用可发生构象改变,导致其亲和力和扩散速率改变而影响其功能,因此定量检测细胞粘附分子的数量、亲和力及扩散速率对探索某些疾病的发病机制、监视疾病的发生、发展过程和指导临床治疗有重要意义。目前的检测方法,大多限于用免疫学技术检测其数量,而有关分子的亲和力及扩散速率的检测正在建立中。
  一、细胞表面粘附分子的检测
  1.放射免疫测定法通常用抗细胞粘附分子抗体包被载体,加受检样品后,继加相应单克隆抗体和 同位素 标记的二抗作非竞争性固相放射免疫测定法。2.免疫荧光测定法除常规的间接免疫荧光法外,有条件的实验室,用不同激发波长的荧光素着染色受检细胞,在FACS仪上可同时检测有两种不同的细胞粘附分子。3.酶免疫测定法主要为双抗体夹心ELISA,本法应用最广,但仅能检出一群细胞的表面粘附分子数量,而不能反映单个细胞粘附分子数量的变化。
  二、可溶性粘附分子的检测
  多采用双抗体夹心ELISA,研究最多的选择素家和 免疫球蛋白 超家族。前者有E、L、P三型,均可见血液中。溶血性尿毒症和血小板减少性紫癜患者血液中,P选择素比正常人高2~3倍,而败血症、HIV感染和艾滋病患者血液中L选择素明显增高。血液中存在可溶性E选择素是内皮细胞激活的证据,败血症、糖尿病等患者血液中E选择素水平增高,一般与疾病的活动性无关,而与器官受损程度相关。如败血症患者,可溶性E选择素可增高20倍以上,据称与疾病的严重性或预后有关。肝炎、肝硬化等患者血液中超 免疫球蛋白 家族中ICAM-1水平增高,与肝功能损害指标相关。总之,现已发现许多疾病可见细胞粘附分子数量的异常,但这类工作尚处于探索阶段,有待深入研究和资料的积累才能判断其确切的临床意义。
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