免疫PCR技术(Immuno-PCR)
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免疫PCR方法(Immuno-PCR)是Takeshi等1992年将免疫学反应和PCR技术相结合而创建的一种新的检测技术,具有抗原、抗体反应的特异性和PCR技术的高效性。它运用PCR的高度敏感性来放大抗原抗体反应的特异性,使实验中只需数百个抗原分子即可检测,甚至在理论上可检测到1至数个抗原分子。这种灵敏度使免疫检测技术达到了一个新的高度。
免疫PCR主要由两个部分组成:第一部分是类似于普通酶联免疫吸附实验(ELISA)的抗原抗体反应;第二部分即常规的PCR扩增和电泳检测。其基本过程如下:首先将待检测的抗原吸附于固相,经封闭和冲洗后加入特异的抗体,此抗体常采用 生物 素标记。经孵育和冲洗后加入作为连接分子的亲和素或叶绿素,再孵育和冲洗加 生物 素标记的DNA,孵育和冲洗去除游离的DNA分子,然后加PCR扩增系统放大结合于固相的DNA,用 琼脂 糖凝胶电泳检测放大的PCR产物。
近几年来,科技界陆续提出了免疫基因组学、肿瘤免疫组学、免疫组学、抗原组学、抗原表位组学等新概念。这些概念的提出,表示继基因组、蛋白质组之后在科学上又一个新领域的产生;对生物技术来说,基因组研究的应用,通过抗原表位组学、 抗体 组学和抗原表位组学与 抗体 组学是建立在基因组学和蛋白组学基础上的新兴领域,正在成长为继基因组和蛋白组后的科学热点。应用相关的学科的最新成就,结合相关的技术,经过建立抗原表位库和抗体库,高通量筛选抗原靶标和抗原表位,可大大加速诊断、治疗药物靶标的筛选和研究与开发的进程。