生物化学与分子生物学实验技术

1．生物化学与分子生物学实验有着独特的实验技能和基本操作。学生应本着认真、积极的态度，在教师的指导下，完成每次实验。不仅要明白实验的原理、步骤和关键所在，还要能发现问题，积累经验，并对实验结果展开讨论。
2．课前认真预习，实验过程中，严格遵守操作规范，实验结果和数据应如实、及时记录，并当堂写出原始实验结果记录，经教师检查同意并签字后，方可离开。实验报告应在实验后一天内完成并交到指定地点。
3．遵守课堂纪律，不得迟到早退，实验室内不得吸烟、饮食、大声喧哗，学生之间应互助友爱。
4．爱护实验器材。在了解 仪器 性能和操作规程之前，不得冒然使用，更不可擅自拆卸或将部件带出室外。实验过程中，如发现 仪器 损坏或运转异常，应立即妥善处理。
5．注意安全。对腐蚀性 试剂 或易燃有机溶剂的操作应格外小心；水电煤气在停用时应及时关闭。
6．保持室内整洁，公用 试剂 用毕应立即盖好，放回原处，实验中应注意节约。
7．学生应轮流值日，负责实验室的卫生和安全，并协助教师从事一些服务性工作。

二、安全措施
1．进入实验室必须穿实验工作服。
2．实验室内严禁吸烟，易燃易爆物品应远离火源。低沸点的有机溶剂，不得在火焰上直接加热；必须加热时，可在水浴进行。
3．使用电器设备要严防触电。切忌用湿手触摸电器。发现仪器漏电时，立即报告并停止使用。万一发生触电事故，应立即关闭电源，并用干木棍将导线挑离被电者身体；对呼吸停止者， 应立即进行人工呼吸，并及时送医院抢救。
4．强酸、强碱液体或剧毒液体，不得用口经吸量管吸取，必须使用橡皮球，万一不慎吸入口内或沾及皮肤，应立即用清水多次漱口或局部冲洗。若为强碱灼伤，清洗后可用5％硼酸溶液清洗；若为强酸灼伤，水洗后可用5％碳酸氢钠溶液清洗。严重灼伤者，应立即将残留在身体上的液体轻轻冲洗后，送医务部门处理。
5．用后的浓酸、浓碱残液，应倒入指定的容器。不要直接倒入水池内，以免蚀损水管；若少量残液已倒入池内，应立即放水冲稀流走。
6．万一着火，不要惊惶失措，要立即切断火源和电源，搬走易燃物品，同时立即报告指导老师进行紧急处理，严防火势蔓延；若火势蔓延，应立即报警。万一衣服着火，切忌惊慌奔跑，可用衣服包裹身体或就地翻滚，借以绝氧灭火。

三、玻璃器皿的洗涤与干燥
生化实验常用各种玻璃仪器，其清洁程度直接影响实验结果的准确性。因此，清洁玻璃仪器不仅是实验前后的常规工作，也是—项重要的技术性工作。清洗玻璃仪器的方法很多，需根据实验要求，污物的性质和沾污程度选用合适的清洁方法。
1．新购玻璃仪器的清洗：新购玻璃仪器，其表面附有碱质，可先用肥皂水刷洗，再用流水冲净，浸泡于l～2％盐酸中过夜，再用流水冲洗，最后用蒸馏水冲洗2～3次，干燥备用。
2．使用过的玻璃仪器的清洗
(1)一般玻璃仪器：如试管、烧杯、锥形瓶等，先用自来水洗刷后，用肥皂水或去污粉刷洗，再用自来水反复冲洗，去尽肥皂水或去污粉，最后用蒸馏水淋洗2～3次。干燥备用。
(2)容量分析仪器：吸量管、滴定管、容量瓶等，先用自来水冲洗，待晾干后，再用铬酸洗液浸泡数小时，然后用自来水充分冲洗，最后用蒸馏水淋洗2～3次，干燥备用。
(3)比色杯：用毕立即用自来水反复冲洗。洗不净时，用盐酸或适当溶剂冲洗，再用自来水冲洗。避免用碱液或强氧化剂清洗，切忌用试管刷或粗糙布(纸)擦拭。
上述所有玻璃器材洗净(以倒置后器壁不挂水珠为干净的标准)后，根据需要晾干或烘干。
1．晾干：不急用的玻璃仪器洗净后，可沥尽水分。倒置于无尘的干燥处，让其自然风干。
2．加热烘干：一般玻璃仪器洗净并沥尽水分后，可置于电烘箱中烘烤，温度控制在105～ 110℃，烘1h左右。但带有刻度的量器不宜在高温下烘烤。有盖(塞)的玻璃仪器，如容量瓶、称量瓶等，应去盖(塞)后烘烤。

四、移液器的使用
1．刻度吸量管的使用方法(图l-1)
刻度吸量管的规格有0.1ml、0.2ml、0.5ml、lml、 2ml、5ml及10ml等，供量取10ml以下任意体积的液体之用：
(1)执管：将中指和拇指拿住吸量管上口以食指控制流速;刻度数字应朝向操作者。
(2)取液：把吸量管插入液体内(切忌悬空，以免液体吸入洗耳球内)，用洗耳球吸取液体至所取液量的刻度上端1-2cm处，然后迅速用食指按紧吸量管上口，使管内液体不再流出。
(3)调准刻度：将已吸足液体的吸量管提出液面，用滤纸片抹干管尖外壁液体，然后垂直提起吸量管于供器内口(管尖悬离供器内液面)。 用食指控制液流至所需刻度，此时液体凹面、视线和刻度应在同一水平面上，并立即按紧吸量管上口。
(4)放液：放松食指，让液体自然流入受器内，(如移液管标有“吹”字，则应将管口残余液滴吹入受器内)此时，管尖应接触受器内壁，但不应插入受器内的原有液体之中，以免污染吸量管及试剂。
(5)洗涤：吸取血液、尿、组织样品及粘稠试剂的吸量管，用后应及时用自来水冲洗干净。如果吸取一般试剂的吸量管可不必马上冲洗，待实验完毕后，用自来水冲洗干净。晾干水分，再浸泡于铬酸洗液中，数小时后，再用流水冲净，最后用蒸馏水冲洗。晾干备用。用食指控制液流至
2．枪式移液器的使用：
结构见图l-2：①液体吸收钮。②体积选取钮。⑧体积显示。④枪头排放钮。⑤枪头排放器。⑥枪头接嘴。其内部柱塞分2段行程，第l档为吸液，第2档为放液。
(1)调体积选取纽至所需值；(2)套上枪头；(3)垂直持握枪式移液器外壳，按下拇指至第一档；(4)将枪头插入溶液，徐徐松开大拇指，使其复原。(5)排放时，重新将大拇指按下，至第一档后，继续按至第二档排空。
注：移液过程应控制速度、力度。