血清蛋白的醋酸纤维薄膜电泳

一、实验目的
1．掌握电泳法分离血清蛋白质的原理。
2. 掌握血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳的操作方法。
3．测定人血清中各种蛋白质的相对百分含量。
二、实验原理
带电粒子在电场中向与其电性相反的电极方向泳动的现象称为电泳。血清中各种蛋白质的等电点在pH4.0～7.3之间，在pH8.6的缓冲溶液中均带负电荷，在电场中向正极泳动。血清中各种蛋白质的等电点不同，所以带电荷量也不同。此外各种蛋白质的分子大小各有差异，因此在同一电场中泳动的速度不同。分子小而带电荷多者，泳动较快；反之，则较慢。
采用醋酸纤维素薄膜为支持物的电泳方法，称为醋酸纤维素薄膜电泳。该膜具有均一的泡沫状结构（厚约120μm），渗透性强，对分子移动的阻力很弱。用其作支持物进行电泳，具有微量、快速、简便、分离清晰、对样品无吸附现象等优点。现已广泛用于血清蛋白、糖蛋白、脂蛋白、血红蛋白、酶的分离和免疫电泳等方面。
经醋酸纤维素薄膜电泳可将血清蛋白按电泳速度分为5条区带，从正极端依次为清蛋白、α1球蛋白、α2球蛋白、β球蛋白及γ球蛋白，经染色可计算出各蛋白质的百分含量。
三、实验器材
1. 电泳仪：为电泳提供直流电源。
2. 电泳槽：为电泳提供场所。多用有机玻璃制成，电极用铂丝。
3. 血清加样器 ：可用盖玻片或X胶片或微量加样器。
4. 醋酸纤维素薄膜：2cm×8cm
5. 其它： 培养皿（直径9-10cm）、滤纸、玻璃板、镊子等。

DYY-5型稳压稳流电泳仪

DYY-Ⅲ型电泳槽