纸层析法氨基酸的分离鉴定原理与方法

一、实验目的
掌握氨基酸纸层析的方法和原理，学会分析待
    测样品的氨基酸成分。
二、实验原理
纸层析是以滤纸为惰性支持物的分配层析。滤纸纤维上的羟基具有亲水性，吸附一层水作为固定相，有机溶剂为流动相。当有机相流经固定相时，物质在两相间不断分配而得到分离。
溶质在滤纸上的移动速度用Rf值表示：
Rf=原点到层析斑点中心的距离/原点到溶剂前沿的距离
在一定的条件下某种物质的Rf值是常数。Rf值的大小与物质的结构、性质、溶剂系统、层析滤纸的质量和层析温度等因素有关。本实验利用纸层析法分离氨基酸。

三、实验器材

（1）大烧杯（5000mL）：1只/组
（2）微量注射器（100mL）：1只/      组。
（3）喷雾器：公用。
（4）培养皿：1只/组。
（5）层析滤纸（长22cm、宽14cm的新华一号滤纸）：1张/组。
（6）直尺、铅笔：自备。
（7）电吹风：1只/组。
（8）托盘、针、白线：1套/组。
（9）手套：1双/组。
（10）塑料薄膜：公用。
（11）小烧杯：50mL，1只/组。
四、实验试剂


（1）扩展剂：将4体积正丁醇和1体积冰醋酸放入分液漏斗中，与5体积水混合，充分振荡，静置后分层，弃去下层水层。
（2）氨基酸溶液：0.5%的已知氨基酸溶液3种（赖氨酸、苯丙氨酸、缬氨酸），0.5%的待测氨基酸液1种。
（3）显色剂：0.1%水合茚三酮正丁醇溶液。
                    实验试剂