生物发光和化学发光BL/CL用于场流分级法
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2019
生物发光和化学发光 BL/CL 用于场流分级法
场流分级法(FFF)作为一种细胞分拣的新技术,可以从复杂的自然基质中分离几少的特异性的活细胞。FFF的诊断应用需要极为灵敏的BL/CL检测。其进一步的应用还包括:同时分离发光细胞或通过遗传工程或使用BL/CL示踪物与细胞膜特异性结合而发光的细胞。
BL/CL检测已经被证明是一种有效的、多功能的生物学分析工具,适用于多种应用。现在,在很多生物技术领域,BL/CL已经作为一个优秀的基本检测原理得到应用,包括:报告基因技术,基因探针检测。当然,BL/CL技术还可以针对各种医学、制药和环境的目标分析物进行超灵敏检测,正好与目前高通量分析仪器的小型化,生物分析等趋势相吻合。新的BL/CL应用,例如BRET,基因融合,重组全细胞生物传感器和提内全动物成像等等也变得越来越普遍。
伴随着他们这些显著的优点,BL/CL技术同样也有一些缺陷。从实践的观点来看,BL/CL技术与传统的分光光度测定和荧光技术相比,更容易基质的影响。当然,BL/CL检测中的化学反应会被基质中的成分影响(通常是淬灭)。此外,酶或发光蛋白也和CL底物一样,相对荧光分子不稳定。另一个限制因素是,相比分光光度和荧光测量的仪器,BL/CL检测的仪器通常的实验室中此类仪器比较少,特别是需要高灵敏度检测时,所需要的仪器通常非常贵。
随着新的生物技术 工具的不断产生,BL/CL将进一步得到发展。其中一部分是对新的BL报告基因的发现、克隆和测序,进而推动多重标记系统的研究。另一部分,分子、突变体或者组织发射红光或近红外光谱,连同具有更高光子效率的CL系统,会成为有力的工具。伴随着小型化、高分辨率、超灵敏度,可同时检测不同发光探针的彩色CCD等技术在检测仪器上的应用,BL/CL应用技术将得到进一步发展。BL/CL结合上其他的发光反应,例如荧光和热发光或photoacustic发光可以进行更为有趣的应用。