对产生抗体的细胞克隆进行分析
互联网
1151
对产生抗体的细胞克隆进行分析
对产生抗体的细胞克隆，一方面检查其染色体数目，确定是否接近两种亲代细胞染色体之和(约80～100条)。另一方面，取其培养上清或诱生的腹水，检查抗体免疫球蛋白的类型、亚类、特异性、亲和力、识别抗原的表位及其分子量等。
1、杂交瘤细胞染色体的检查 常采用秋水仙素裂解法。
2、McAb类型、亚型的测定 通常以兔抗小鼠Ig类型和亚类的标准抗血清，采用琼脂双扩或ELISA夹心法测定McAb与抗小鼠Ig类型和亚类的反应性，以确定McAb属哪一类型和亚类。
3、McAb的特异性鉴定 其检测方法应该多样化，包括ELISA、免疫荧光、放免测定、间接血凝、印迹试验、抽滤斑点免疫结合法、化学发光免疫斑点法（CDIA)以及各种结合抑制试验等，详细步骤参见有关章节。
4、McAb的效价测定 McAb的效价以培养上清或腹水的稀释度表示。在凝集反应中，腹水效价可达5×104 ；在ELISA或RIA中，腹水效价可达106 ，如低于105 ，该抗体用于诊断的敏感性将不高。
5、McAb的亲和力测定 抗体亲和力的测定对可溶性抗原可采用免疫沉淀、快速ELISA、免疫荧光、RIA竞争抑制试验以及生物传感器分析法等；对细胞性抗原还可采用FACS测定。
6、McAb识别抗原表位的测定 一个抗原分子表面常有多个抗原决定簇，用该抗原制备的McAb，有的是抗同一决定簇，有的则是抗不同决定簇。可用竞争抑制试验、相加指数法、微机集群分析以及分子生物学方法等测定McAb所识别的抗原位点。
7、McAb作用抗原的分子量 常采用免疫印迹试验测定McAb结合的抗原分子量。
