细胞因子及其受体的检测
互联网
2176
细胞因子及其受体的检测
细胞因子(cytokine,CK)是指由免疫细胞(如T细胞、B细胞、NK细胞、单核/巨噬细胞等)和某些非免疫细胞(如内皮细胞、表皮细胞、成纤维细胞、骨髓及胸腺基质细胞等)经刺激而合成、分泌的一类生物活性物质,多属分子量为6~60KD的多肽或糖蛋白。
细胞因子通常包括白细胞介素(interleukin,IL)、干扰素(interferon,IFN)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)、造血因子、趋化因子、各种细胞生长因子等。
细胞因子在体内广泛参与免疫应答及调节、促进组织修复、刺激造血功能、刺激细胞的增殖与分化、参与细胞凋亡等重要生理活动;某些因素可导致一些细胞因子的异常表达或功能异常,从而参与炎症反应、免疫性疾病、肿瘤性疾病等病理过程的发生与发展。细胞因子必须通过与靶细胞膜表面特异性受体(即细胞因子受体,cytokine receptor,CKR)相结合才能发挥其广泛的生物学效应。因此,细胞因子及其受体的检测,无论是对基础免疫学研究,还是对阐明某些疾病的发病机制、疾病诊断、疗效监测及预后判断等临床研究都具有重要意义。
细胞因子及其受体的检测方法一般可分为生物活性检测法、免疫学检测法、细胞因子核酸(基因)检测法(分子生物学检测法)三大类。
细胞因子及其受体的免疫学检测法的基本原理是以细胞因子或细胞因子受体作为抗原,应用标记的特异性抗体,利用抗原抗体特异性反应对待测样品中的细胞因子或细胞因子受体进行特异性检测。可检测体液或细胞培养上清液、细胞膜表面的细胞因子或细胞因子受体,也可检测细胞内(胞浆)的细胞因子。常用的检测方法有EIA法(如ELISA)、RIA法、FIA法、FCM术(如FACS)等。其中以ELISA法最为常用,具有特异、敏感、简便、快速、且干扰因素影响较小等特点。但免疫学检测法需要获得标记的特异性抗体,且所获结果与细胞因子或细胞因子受体的生物学活性并不一定平行,其灵敏度也往往低于生物活性检测法。