噬菌怖肽库技术用于分析蛋白质的抗原表位

互联网2010-12-02

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噬菌怖肽库技术用于分析蛋白质的抗原表位

蛋白质的抗原表位即该蛋白质在参与抗原-抗体反应中直接与特异性抗体结合的氨基酸序列和构象。研究蛋白质的抗原表位对于了解蛋白质的结构与功能、分子识别的基础是十分重要的，也为多肽药物的筛选、疾病新型诊断抗原以及多肽疫苗的研制提供重要的依据和线索。

目前广泛用于蛋白质抗原表位的分析方法主要是肽扫描，即按照蛋白质氨基酸的序列，合成多个线形的重叠肽，再利用抗体筛选能与之发生反应的片段，然后通过氨基酸突变分析法，逐个进行氨基酸的突变，以确定起主要作用的关键氨基酸。但这种方法存在着几方面的缺陷：工作量大，工作效率低；合成肽的成本高；更主要的是必须先确定该蛋白质的完整氨基酸序列。但实际上，序列完全清楚的蛋白质是有限的，因此也限制了该方法的应用范围。另外，大多数蛋白质其抗原表位90％是构象型表位，仅lo％为线性抗原表位。而合成的序列肽一般是模拟蛋白质的线性表位，这就可能会失去大多数的构象型表位信息。而利用噬菌体随机肽库技术就可以弥补这些分析方法的不足。

噬菌体肽库技术既可以筛选出与原始抗原完全相同的线形表位(1inerepitope)，又可以筛选到在氨基酸一级结构上与原始表位不一定有很高同源性甚至截然不同但却能与同一特异性抗体结合的模拟表位(mimotope)，而且这种模拟表位可以引发与天然表位相同特异性的强免疫反应。其整个筛选过程操作比较方便、简单，只需要用抗体对肽库进行筛选和富集，将筛选得到的能与抗体特异性结合的噬菌体肽进行测序，并与天然抗原的序列进行比对，如果在天然抗原的序列中存在相同或相似的序列即认为是抗原表位。因此，噬菌体肽库在蛋白质抗原表位分析中具有广阔的应用前景。