噬菌体肽库技术的特点
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噬菌体肽库技术的特点
(1)在噬菌体 表面展示的融合蛋白或肽直接有效地与其编码基因密切偶联在一起,因而在获得多肽的同时通过对噬菌体单链DNA插入DNA进行测序,从而得到了多肽的编码基因。
(2)库容量大(目前可达到1010 ),选择范围广泛,可能筛选到针对某个生物大分子的新型特异性结合肽,甚至是自然界中不能天然产生的但具有高亲和力的配体分子。而且筛选到的多肽结构多样,为进一步分析研究蛋白质结构与功能提供了大量有用的信息。
(3)筛选过程具有高效、快速等特点,是一种简单的高通量筛选模式,为迅速找到生物大分子的特异性强、亲和力高的结合多肽提供了可能。
(4)噬菌体肽分离、纯化步骤简单,有利于大规模生产,而且试剂常规,价格低廉。目前常用丝状噬菌体在大肠杆菌中扩增时,噬菌体是以出芽的形式释放的,不裂解宿主,这样培养上清液中没有宿主细胞的蛋白质污染,方便噬菌体的分离和纯化过程,只需用PEG一步沉淀就可完成。
(5)缺点:库容多样性易受到多种因素的影响,且获得的是小分子肽亲和力较低;基因表达偏向性对肽种类的影响;转化效率引起库容量的限制;筛选中假阳性克隆的干扰严重。