微量补体结合反应（以钩端螺旋体病为例）

本试验采取热法血清稀释法。每滴相当于0.02ml，总量为6滴，相当于0.12ml。

<font>一、材料</font>

<font>1、抗原</font> 系各型菌株培养物多价抗原，按瓶签说明倍数稀释；

<font>2、溶血素</font> 正式试验时使用2个工作单位；

<font>3、补体系冻干补体</font> 用灭菌生理盐水作1:5基础稀释。在溶血素效价测定和补体效价滴定时均作1:60稀释，在正式试验时，用2个工作单位；

<font>4、1％的红血球悬液</font> 用灭菌生理盐水洗涤与配制。在使用时与等量含2个工作单位的溶血素液配成致敏红血球悬液；

<font>5、阳性血清</font> 正式试验时1:100稀释；

<font>6、阴性血清</font> 正式试验时1:10稀释；

<font>7、生理盐水。</font>

<font>二、预实验</font>

<font>1、溶血素效价测定</font> 用小试管做时，单位为ml；用血清稀释板做时，单位为滴。

<font>（1）溶血素稀释</font>

先将溶血素做1:1000基础稀释。见表1。

表1 溶血素稀释表（单位：滴）

稀释度	1：1000	1：2000	1：3000	1：4000	1：5000	1：6000	1：7000	1：8000
生理盐水	——	1	2	3	4	5	6	7
1：1000溶血素	1	1	1	1	1	1	1	1

<font>（2）溶血素效价测定</font>

见表2。

表2 溶血素效价测定表（单位：滴）

	1：1000	1：2000	1：3000	1：4000	1：5000	1：6000	1：7000	1：8000
溶血素	1	1	1	1	1	1	1	1
1：60补体	2	2	2	2	2	2	2	2
生理盐水	2	2	2	2	2	2	2	2
1%红血球悬液	1	1	1	1	1	1	1	1
置微型振荡器震荡3-5min后，放37℃水浴10min
溶血程度举例	#	#	#	#	#	＋＋＋	＋	－

根据上述结果,溶血素效价为1:5000即为一个工作单位，2个工作单位溶血素为1:2500稀释度。