多肽中氨基酸置换问题
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问:我实验中需要确定多肽(8肽)中的某个氨基酸的作用,把该氨基酸用其它氨基酸置换。请教“进行氨基酸置换”时有什么要求?如何选择哪个氨基酸可用来做置换前者?选择时有什么原则或方法?
答:1. 一般地,在蛋白中研究某部分(domain)氨基酸的重要性,通常采取Ala scanning的办法。因为Ala的侧链最简单,如果发生了什么效应可以减少一些其它因素的可能。
但这种情况,基本上是没有任何背景的情况下人们采取的办法。
2. 如果你对突变置换有一定的目的性,比如通过同源比较或者别的方法,想研究某特定氨基酸的意义,这时候你就有目的性了。不过我估计你可能不是这种情况。
3. 总共就一个氨基酸,如果你愿意,你可以换成正电荷氨基酸,负电荷氨基酸和不带电荷极性及非极性氨基酸。不过,最好在做之前对预期的结果有可能的解释。否则数据出来自己都不知道是为什么。
4. 如果有类似的文献支持,更好。
对于第一点,你搜搜ala scanning可以看到很多文献。个人浅见,供参考。