几丁质酶系统交流平台

问：我做几丁质酶已经有一年多了，现在也积累了一些经验，希望和做相关课题的同仁们相互交流一下经验，有问题的也可以问，我会尽量给大家回答，也希望知道的朋友尽量给予帮助。谢谢！

问：我真是太激动了，现在正准备做几丁质酶的分离、纯化；查了很多资料，但还是不太清楚其活性测定方法（一般都是用sigma公司的，有一种试剂500mg就30美金），肯请你为我介绍实用的方法，谢谢！

答：测几丁质酶活一般都用DNS法，不知道你做的是植物几丁质酶还是微生物的？或是动物的？一般方法是：
取0.5ml的几丁质酶液，和0.5ml的几丁质胶体混合，25度培养24h，然后在510nm下测透光率就可以了。

答：做PAGE时可以和蛋白预染Marker一起跑，然后把跑完的胶片转移到几丁质琼脂平板上，看产生的透明圈可以大体知道分子量的大小。注意在平板上不要让胶移动，可以适当加一些醋酸缓冲液加速酶的扩散。这种方法只是粗测是不是产几丁质酶，产几丁质酶的种类，和产酶的分子量的大小。不知道你做几丁质酶的目的是什么？纯化还是找基因？