互联网2013-11-13
黑豆蚜用盆栽蚕豆(Vicia faba L.)苗饲养,温度23-25℃,光周期16:8。
1. 脱共生蚜虫的培养
将3周大的蚕豆苗根部冲洗干净后浸在200ug/ml的利福平溶液中,24小时后,接上成蚜使之产子,10小时后移去成蚜有,再过48小时后移入正常植株饲养。经过这种处理所获得的蚜虫即是脱共生蚜虫。未经抗生素处理的正常蚜虫称为共生蚜虫。
2. 脱共生蚜虫发育和生殖观察
在每株豆苗上接5头利福平处理过的黑豆蚜,用正常蚜虫作对照。观察并记录蚜虫的发育情况和生殖数量。在蚜虫发育为成蚜的当天在显微镜下测量蚜虫的体长和体宽。
3. 总蛋白和游离氨基酸含量测定
1) 蚜虫体内的总蛋白含量测定用Bradford (1976)的方法,用牛血清蛋白作对照。按照Wilkinson(1996)的方法提取总蛋白。取10-30头7日龄的蚜虫,称重后加0.4ml冰冷的50mM Tris-HCl pH7.5进行匀浆,13000rpm离心l0min,上清液用于总蛋白含量的测定。
2) 游离氨基酸的提取方法是:将蚜虫称重后,在80%的冷甲醇中匀浆,13000rpm离心l0min,上清液用于测试。本试验用Hitachi 835-50型氨基酸自动分析进行测试,总共可分析出17种氨基酸。
4. 统计分析
所测定的数据用学生氏t-测验进行分析,用Microsoft Excel 2002软件(Microsoft)进行计算。
相关产品推荐
黑豆酸,451-13-8,阿拉丁
¥952.90
Butaprost,游离酸,433219-55-7,阿拉丁
¥1012.90
NAI,用于体内RNA SHAPE-MaP实验的试剂,1055970-47-2,阿拉丁
¥99.90
牛总蛋白(TP)elisa试剂盒
¥1280
抗癌代谢化合物库,阿拉丁
¥62439.90
相关问答
问
hplc怎么将游离氨基酸和结合氨基酸分开测定
菌群代谢物与宿主代谢物
细胞外通量和代谢组分析需要相对高的细胞数量,怎么完成从体外到体内的转化和从老鼠到人的验证?
相关方法
药物体内代谢实验
2022-02-11
植物组织中游离氨基酸总量的测定
植物体内游离脯氨酸含量的测定
推荐阅读
黑豆蚜胞内共生菌对日本柄瘤蚜茧蜂发育和繁殖的影响
共生菌在黑豆蚜生长和繁殖中的作用
植物体内游离氨基酸总量的测定