互联网2013-11-13
黑豆蚜用盆栽蚕豆(Vicia faba L.)苗饲养，温度23-25℃，光周期16:8。
1. 脱共生蚜虫的培养
将3周大的蚕豆苗根部冲洗干净后浸在200ug/ml的利福平溶液中，24小时后，接上成蚜使之产子，10小时后移去成蚜有，再过48小时后移入正常植株饲养。经过这种处理所获得的蚜虫即是脱共生蚜虫。未经抗生素处理的正常蚜虫称为共生蚜虫。
2. 脱共生蚜虫发育和生殖观察
在每株豆苗上接5头利福平处理过的黑豆蚜，用正常蚜虫作对照。观察并记录蚜虫的发育情况和生殖数量。在蚜虫发育为成蚜的当天在显微镜下测量蚜虫的体长和体宽。
3. 总蛋白和游离氨基酸含量测定
1) 蚜虫体内的总蛋白含量测定用Bradford (1976)的方法，用牛血清蛋白作对照。按照Wilkinson(1996)的方法提取总蛋白。取10-30头7日龄的蚜虫，称重后加0.4ml冰冷的50mM Tris-HCl pH7.5进行匀浆，13000rpm离心l0min，上清液用于总蛋白含量的测定。
2) 游离氨基酸的提取方法是：将蚜虫称重后，在80%的冷甲醇中匀浆，13000rpm离心l0min，上清液用于测试。本试验用Hitachi 835-50型氨基酸自动分析进行测试，总共可分析出17种氨基酸。
4. 统计分析
所测定的数据用学生氏t-测验进行分析，用Microsoft Excel 2002软件(Microsoft)进行计算。
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