yeast transformation
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实验步骤
a. 在500ml锥形瓶中摇100ml 酵母菌种直到OD值达到0.4（30℃），然后分装为两个50ml离心3000g五分钟。
b. 弃上清，用20mlddH2O 冲悬，离心3000g五分钟。
c. 弃上清，用10ml 1XTE/LiAc冲悬，离心3000g五分钟。
d. 小心弃上清，用175μl1XTE/LiAc冲悬。
a. 每个转化需要50μl 细胞，5μl刚煮过的carrier DNA, 以及100ng质粒，混匀后加300μl PEG/LiAc。
d. 室温高速离心弃上清，然后用500μl ddH2O冲悬图板。
a. 用小剂量的方法先将感兴趣的蛋白转到感受态中，然后再用该菌株制备感受态。
b. 先在3ml单缺的培养基里培养细胞8-12h，然后从中转移20μl到50ml选择培养基中培养16-20小时，待OD达到0.15-0.3。
c. 700g5min集菌，弃上清，再用100mlYPAD冲悬起来，继续在30℃中培养3-5hrs到OD 0.4。
d. 700g五分钟集菌（50ml的管子中分为两管），弃上清，用60ml（30each）ddH2O冲悬。然后再集菌弃上清，用3ml 1.1X TE/LiAc冲悬.
e. 室温高速离心，弃上清，用600μl1.1XTE/LiAc冲悬。
g. 加160μlDMSO混匀水浴42度20 分钟。每十分钟混匀一次。
h. 700g离心去上清，3mlYPAD冲悬在30度摇90分钟。离心集菌，去上清，最后用15ml0.9%NaCl冲悬，涂板。
