DNA Marker电泳常见问题分析

　　来源：中国色谱技术网

    Q：为什么marker条带非常模糊，无法辨别具体条带？

　　A：出现上述情况，可能有以下几个原因：1.marker条带出现了降解。请确保在使用过程中避免核酸酶污染；2.

　　电泳缓冲液陈旧。电泳缓冲液多次使用后，离子浓度降低，pH值上升，缓冲能力减弱，从而影响电泳效果，建议经常更换电泳缓冲液；3.

　　电泳条件不合适。电泳时电压应不超过20V/cm，温度应低于30℃；4.marker上样量过多。请根据说明书选用合适上样量；5.

　　凝胶质量不好。建议使用质量较好的琼脂糖；此外，凝胶凝固不均匀也会导致条带模糊。

　　Q：为什么marker条带出现不规则的条带（如哑铃状等）？

　　A：出现上述情况，多与以下几个原因有关：1.

　　电泳缓冲液陈旧。老化的电泳缓冲液离子浓度降低，pH值上升，缓冲能力减弱，从而影响电泳效果，建议经常更换电泳缓冲液；2.

　　电泳条件不合适。电泳时电压应不超过20V/cm，电压太高可能也会导致marker条带出现不规则现象。此外，凝胶质量差以及凝胶冷却时凝

　　固不均匀也会导致该现象出现。

　　Q：为什么marker条带非常弱或者根本没有条带？

　　A：出现上述情况可能是：1.marker上样量较低，可适当增加上样量；2.凝胶质量较差或凝胶凝固不均匀也会导致电泳条带弱或根本没有

　　条带；3.

　　电泳时间过长导致marker条带跑出凝胶，可缩短电泳时间，降低电压，增加凝胶浓度。

　　Q：为什么marker缺带？

　　A：对于含有较小片段的marker，如果出现缺带现象，可能是因为：1.

　　小条带跑出凝胶或分子量大小非常相近的条带不易辨认所致，可适当缩短电泳时间，降低电压，同时增加凝胶浓度；2.

　　凝胶中EB含量过低，导致大片段结合EB量太少或没有，在紫外光下亮度太低，可适当增加EB用