色谱柱使用过程中的护柱方法
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1、最好用预柱。(但要注意,若有时出峰异常,要先看看是不是它有问题了)
2、每次做完分析,都要进行冲洗,
A分析用流动相中若无酸、碱、盐类物质,建议用90%甲醇冲洗30~60min;
B若分析用流动相中含以上物质,要先用10%甲醇(或用与分析用流动相同比例,把含酸、碱、盐溶液换成水)冲洗1小时左右,再C梯度走到90%甲醇冲洗30~60min(若用多元泵)。有必要时再循环几次,可以适当缩短时间。
D若长时间不用该色谱柱,要冲洗好后,用纯甲醇或乙腈封存。
3、若流动相中用到离子对试剂,更应该好好冲洗,且该色谱柱最好作为专用,不能再做其它物质分析用。因色谱柱填料性质已与原来所不同,在该柱上所摸索的色谱条件,可能在其它同类柱子上得不到重现。
4、尽量避免反冲,除非该色谱柱厂家明确说明允许。
5、普通C18柱尽量避免在40℃以上的温度下分析
6、定期测柱效,有下降,可以用10%异丙醇甲醇冲洗色谱柱。若柱效还没有改善,可以再生,甲醇-二氯甲烷-甲醇。