液相色谱应用实例二
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例11．植物甾醇分析（生物制药）
样品：含β-谷甾醇、豆甾醇、菜油甾醇、菜籽甾醇和胆固醇的混合物
色谱仪：“南京科捷LC600”液相色谱仪，配有色谱工作站
检测器：Alltech2000型ELSD蒸发光散射检测器
漂移管温度为70℃，氮气流速1.6L/min
色谱柱：SupecolDiscoueryC18，5μm，柱长25cm，柱径4.6mm
流动相：甲醇
流速：1mL/min
进样：10μL
结果：所有组分在19min之内全部流出，各组分完全分离，组分流出顺序为：峰1为菜籽甾醇保留时间13.70min，峰2为胆固醇保留时间14.62min，峰3为豆甾醇保留时间15.45min，峰4为菜油甾醇保留时间15.97min，峰5为β-谷甾醇保留时间17.05min。
例12．甾族化合物分析
样品：含孕酮等4种物质的混合物
色谱仪：“南京科捷LC600”液相色谱仪，四元梯度泵，色谱工作站
检测器：MarkⅡA型ELSDAlltech蒸发光散射检测器
漂移管温度为135℃，氮气流速为1.2L/min。
色谱柱：HyperilC18，5μm，柱长25cm，柱径4.6mm
流动相：甲醇：水=70：30
流速：1.2mL/min
进样：20μL
结果：所有组分在12min之内全部流出，各组分完全分离，组分流出顺序为：峰1为氢化可的松，峰2为强的松，峰3为睾酮，峰4为孕酮。
例13．皮质醇分析
样品：含皮质醇等5种物质的混合物
色谱仪：“南京科捷LC600”液相色谱仪，配有色谱工作站
检测器：荧光检测器，流动池30μL
激发波长370nm，检测波长480nm，狭缝均为20nm
色谱柱：FinepakC18，10μm，柱长25cm，柱径4.6mm
流动相：甲醇：水=50：100（v/v）
流速：0.8mL/min
进样：20μL
结果：所有组分70min之内全部流出，各组分完全分离，组分流出顺序为：峰1为皮质醇保留时间15.8min，峰2为β-Methasone保留时间20.0min，峰3为四氢皮质酮保留时间22.5min，峰4为四反皮质醇保留时间32.5min，峰5为四氢-11-脱氧皮质醇保留时间65.8min。
例14．胆固醇分析
样品：含胆固醇等6组分的混合物
色谱仪：“南京科捷LC600”液相色谱仪，配有色谱工作站
检测器：ELSD美国AlltechMKⅢ蒸发激光散射检测器
漂移管温度为65℃，氮气流速为2.0L/min。
色谱柱：AllsphereSilica，3μm，柱长10cm，柱径4.6mm
流动相：A为离子对试剂，B为正己烷，C为水
梯度：时间0min7min15min
A58%52%52%
B40%40%40%
C2%8%8%
流速：1.25mL/min
进样：20μL
结果：所有组分在13min之内全部流出，各组分完全分离，组分流出顺序为：峰1为胆固醇，峰2为棕榈酸，峰3为磷脂酰乙醇胺，峰4为磷脂酰丝氨酸，峰5为磷脂酰胆碱，峰6为神经鞘磷脂。
例15．磷脂分析（生物）
样品：含磷脂酰肌醇等4种物质混合物
色谱仪：“南京科捷LC600”液相色谱仪，四元梯度泵，色谱工作站
检测器：500型ELSDAlltech蒸发光散射检测器
漂移管温度为120℃，氮气流速为2.7L/min。
色谱柱：RosilNH2，5μm，柱长15cm，柱径4.6mm
流动相：A为无水乙醇，B为0.2mol/L的草酸溶液
梯度：时间0min15min30min30.1min35.1min
A95%85%85%95%95%
B5%15%15%5%5%
流速：1.5mL/min
进样：10μL
结果：所有组分在35min之内全部流出，各组分完全分离，组分流出顺序为：峰1为磷脂酰乙醇胺，峰2为磷脂酰丝氨酸，峰3为磷脂酰胆碱，峰4为磷脂酰肌醇。
例16．多肽分析（生物）
样品：含G-Y等3种多肽物质的混合物
色谱仪：“南京科捷LC600”液相色谱仪，配有色谱工作站
检测器：ELSD美国AlltechMKⅢ蒸发激光散射检测器
漂移管温度为110℃，氮气流速为2.19L/min
色谱柱：AlltimaTMC18，5μm，柱长25cm，柱径4.6mm
流动相：0.05%TFA水溶液：乙腈=65：35
流速：0.6mL/min
进样：20μL
结果：所有组分在5min之内全部流出，各组分完全分离，组分流出顺序为：峰1为G-Y，峰2为G-L-Y，峰3为K-D。
例17．维生素分析（食品分析）
样品：含维生素A等5种物质的混合物
色谱仪：“南京科捷LC600”液相色谱仪，配有工作站
检测器：500型ELSDAlltech蒸发光散射检测器
漂移管温度为70℃，氮气流速为2.0L/min
色谱柱：AdsorbosphereC18，5μm，柱长25cm，柱径4.6mm
流动相：甲醇：乙醇=97：3
流速：1mL/min
进样：20μL
结果：所有组分在21min之内全部流出，各组分完全分离，组分流出顺序为：峰1为维生素A，峰2为维生素D2，峰3为维生素D3，峰4为维生素E，峰5为维生素K1。
例18．抗菌素分析（药物）
样品：含有红霉素等5种抗菌素的混合物
色谱仪：“南京科捷LC600”液相色谱仪
配有570自动进样器，Rheadyane77251进样阀，HP化学工作站
检测器：2000型ELSDAlltech蒸发光散射检测器
漂移管温度为95℃，氮气流速为2.0L/min
色谱柱：AlltimaTMC18，5μm，柱长15cm，柱径4.6mm
流动相：A为0.2%五氟丙酸，B为甲醇
梯度：时间0min5min
A/B55%/45%35%/65%
流速：1mL/min
进样：10μL
结果：所有组分在6min之内全部流出，各组分完全分离，组分流出顺序为：峰1为红霉素，峰2为链霉素，峰3为托布霉素，峰4为阿米卡星，峰5为新霉素。
例19．无活菌素分析（生物制药）
样品：含无活菌素等5种物质的混合物
色谱仪：“南京科捷LC600”液相色谱仪
配有570自动进样器，Rheadyane77251进样阀，HP化学工作站
检测器：2000型ELSDAlltech蒸发光散射检测器
漂移管温度为96℃，氮气流速为2.9L/min
色谱柱：AlltimaTMC18，5μm，柱长25cm，柱径4.6mm
流动相：THF：水=60：40
流速：1mL/min
进样：20μL
结果：所有组分在20min之内全部流出，各组分完全分离，组分流出顺序为：峰1为无活菌素，峰2为单活菌素，峰3为二活菌素，峰4为三活菌素，峰5为四活菌素。
例20．非离子型去垢剂分析（化学化工）
样品：3种非离子型去垢剂物质的混合物
色谱仪：“南京科捷LC600”液相色谱仪，配有色谱工作站
检测器：2000型ELSDAlltech蒸发光散射检测器
漂移管温度为65℃，氮气流速为1.9L/min
色谱柱：AlltechEconosphereTMC18，5μm，柱长15cm，柱径4.6mm
流动相：甲醇：水=90：10
流速：0.8mL/min
进样：20μL
结果：所有组分在5min之内全部流出，各组分完全分离，组分流出顺序为：峰1为n-葵基-β-D-吡喃葡萄糖甙，峰2为n-十二烷基-β-D-吡喃葡萄糖甙，峰3为n-辛葵基-β-D-吡喃葡萄糖甙。
