液相色谱常见故障及排除

1、柱压升高

　　原因：色谱柱入U滤片被流动相或样品中颗粒堵住。

　　样品组分在滤片上沉淀堵住滤片。

　　解决方法：卸下入口接头的滤片，使用1：1的硝酸溶液超声清洗5min，再用水、甲醇清洗除去水份。样品及流动相使用0．45μm滤膜除去微量杂质。使用流动相作溶剂配制样品。

　　2、新柱柱效低柱外死体积大

　　原因：样品在流动相中溶解不好，影响传质过程。更换连接管，重新连接色谱柱，降低死体积。

　　解决方法：使用合适的流动相或使用流动相溶解样品。

　　3、旧色谱柱柱效低，分离不好，柱入口床层塌陷

　　原因：填料被流动相溶蚀而流失。

　　解决方法：用同型填料填补柱效可部分恢复。对硅胶质填料，流动相PH值在2―7范围内，否则可能被溶蚀。

　　4、旧色谱柱柱效低分离不好，有时出现双峰

　　原因：入门填料被污染变质所致。

　　解决方法：用强溶剂冲洗。刮除被污染的床层，用同型的填料填补柱效可部分恢复。污染严重，则废弃或重新填装。

　　5、新柱接到仪器上后，柱头漏液

　　原因：柱接头与仪器之间连接管的压环变形量不够。

　　解决方法：用扳手顺时针方向拧紧1／4圈直到不漏液为止。

　　6、新柱接到仪器上后，启动仪器没有柱压降

　　原因：柱放置时间过长柱内充装的液体己挥发干。

　　解决方法：继续开泵，用流动相将柱内气体置换掉。

　　7、新柱接到仪器上后，检测器出口不断有小气泡出现

　　原因：①同上。

　　②流动相脱气不彻底特别是MeOH／H20体系由于氢键作用很容易出现气泡。

　　解决方法：①同上。

　　②配好流动相后一定要进行脱气处理。

　　8、新柱接到仪器上后柱压降不断增加，甚至超过仪器的耐压限

　　原因：柱入口滤片被固体颗粒堵塞或被毒菌堵塞。

　　解决方法：更换或清洗柱入口滤片；用0．45μm过滤膜过滤流动相除去微小颗粒物。

　　9、进样次数增加柱压降逐渐增加

　　原因：①样品中含有不溶于流动相的微小颗粒物。

　　②样品在流动相中析出微小结晶。

　　解决方法：①用0．45μm过滤膜过滤样品。

　　②推荐使用流动相溶解样品。

　　10、使用―段时间后，柱效下降，分离不好

　　原因：①柱填料被流动相溶解而流失。

　　②柱填料被样品杂质污染。

　　解决方法：①推荐使用予柱。如柱床层塌陷，用相同型号填料填补。

　　②推荐使用保护柱或用强溶剂冲洗色谱柱除去污染杂质。

　　11、柱使用一段时间后，柱效下降出现双峰

　　原因：柱入口床层被污染使柱填料变质。

　　解决方法：用强溶剂冲洗除去杂质。

　　12、柱使用―段时间后，柱效下降，出现峰拖尾

　　原因：柱入口床层被污染。

　　解决方法：用强溶剂冲洗20-30ml，若效果不明显应废弃。

　　13、使用缓冲液作流动相时，柱压降升高很快

　　原因：霉菌生长所致。

　　解决方法：①在流动相中加入有毒物质或加叠氯化钠防止霉菌生长。

　　②实验结束后先用纯水后用MeOH各冲洗20-30ml后关机。