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液相色谱常见故障及排除

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    1、柱压升高

  原因:色谱柱入U滤片被流动相或样品中颗粒堵住。

  样品组分在滤片上沉淀堵住滤片。

  解决方法:卸下入口接头的滤片,使用1:1的硝酸溶液超声清洗5min,再用水、甲醇清洗除去水份。样品及流动相使用0.45μm滤膜除去微量杂质。使用流动相作溶剂配制样品。

  2、新柱柱效低柱外死体积大

  原因:样品在流动相中溶解不好,影响传质过程。更换连接管,重新连接色谱柱,降低死体积。

  解决方法:使用合适的流动相或使用流动相溶解样品。

  3、旧色谱柱柱效低,分离不好,柱入口床层塌陷

  原因:填料被流动相溶蚀而流失。

  解决方法:用同型填料填补柱效可部分恢复。对硅胶质填料,流动相PH值在2―7范围内,否则可能被溶蚀。

  4、旧色谱柱柱效低分离不好,有时出现双峰

  原因:入门填料被污染变质所致。

  解决方法:用强溶剂冲洗。刮除被污染的床层,用同型的填料填补柱效可部分恢复。污染严重,则废弃或重新填装。

  5、新柱接到仪器上后,柱头漏液

  原因:柱接头与仪器之间连接管的压环变形量不够。

  解决方法:用扳手顺时针方向拧紧1/4圈直到不漏液为止。

  6、新柱接到仪器上后,启动仪器没有柱压降

  原因:柱放置时间过长柱内充装的液体己挥发干。

  解决方法:继续开泵,用流动相将柱内气体置换掉。

  7、新柱接到仪器上后,检测器出口不断有小气泡出现

  原因:①同上。

  ②流动相脱气不彻底特别是MeOH/H20体系由于氢键作用很容易出现气泡。

  解决方法:①同上。

  ②配好流动相后一定要进行脱气处理。

  8、新柱接到仪器上后柱压降不断增加,甚至超过仪器的耐压限

  原因:柱入口滤片被固体颗粒堵塞或被毒菌堵塞。

  解决方法:更换或清洗柱入口滤片;用0.45μm过滤膜过滤流动相除去微小颗粒物。

  9、进样次数增加柱压降逐渐增加

  原因:①样品中含有不溶于流动相的微小颗粒物。

  ②样品在流动相中析出微小结晶。

  解决方法:①用0.45μm过滤膜过滤样品。

  ②推荐使用流动相溶解样品。

  10、使用―段时间后,柱效下降,分离不好

  原因:①柱填料被流动相溶解而流失。

  ②柱填料被样品杂质污染。

  解决方法:①推荐使用予柱。如柱床层塌陷,用相同型号填料填补。

  ②推荐使用保护柱或用强溶剂冲洗色谱柱除去污染杂质。

  11、柱使用一段时间后,柱效下降出现双峰

  原因:柱入口床层被污染使柱填料变质。

  解决方法:用强溶剂冲洗除去杂质。

  12、柱使用―段时间后,柱效下降,出现峰拖尾

  原因:柱入口床层被污染。

  解决方法:用强溶剂冲洗20-30ml,若效果不明显应废弃。

  13、使用缓冲液作流动相时,柱压降升高很快

  原因:霉菌生长所致。

  解决方法:①在流动相中加入有毒物质或加叠氯化钠防止霉菌生长。

  ②实验结束后先用纯水后用MeOH各冲洗20-30ml后关机。

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