气相色谱法测定法莫替丁中有机溶剂残留量

摘要：目的：建立法莫替丁中甲醇、丙酮和乙醇残留量的测定方法。方法采用毛细管气相色谱法。色谱柱为HP-Wax；柱温：50℃保持3min。以20℃/min升温至120℃保持4min；载气为氮气；检测器为FID；外标法计算含量。结果：在该色谱条件下，测得各溶剂线性均良好( r =0.9996～0.9997)；平均回收率分别为97.86%、98.16%和98.04%，RSD分别为1.34%、1.21%和0.94%；甲醇、丙酮和乙醇的最低检测限分别为0.004%、0.002%和0.004%；3批样品中上述有机溶剂残留量均符合要求。结论：该毛细管气相色谱法灵敏、准确、可靠，适用于本品中有机溶剂残留量测定。
关键词：法莫替丁  毛细管气相色谱法  有机溶剂残留量
      药物中的残留溶剂是指在原料药或赋型剂的生产中，以及在制剂制备过程中产生或使用的有机挥发性化合物。由于残留溶剂不仅没有疗效，还可能增加药物的毒副作用，而且影响药物的稳定性，故所有的有机溶剂应尽可能除去。为了保护患者免受药物中残留有机溶剂的伤害，需对药品在生产过程中引入的有机溶剂残留量进行测定。法莫替丁为组胺H2受体阻滞药，对胃酸分泌具有明显的抑制作用，适用于消化性溃疡(胃、十二指肠溃疡)、急性胃黏膜病变、反流性食管炎以及胃泌素瘤。由于合成本品过程中使用甲醇等有机溶剂，故有可能会残留在产品中，本文参考中国药典2000年版二部法莫替丁项下方法，建立了气相色谱法，以毛细管柱代替填充柱，同时测定法莫替丁中甲醇、丙酮和乙醇残留量，结果表明本法分离度高、灵敏、准确且简便。
1　实验部分
1. 1　仪器与试药
      美国惠普公司HP5890型气相色谱仪，甲醇、丙酮、乙醇及二甲基甲酰胺(DMF)均为分析纯试剂。法莫替丁自制样品(批号200302001、200302002、200302003)，法莫替丁市售品(郑州瑞泰制药有限公司，批号20030203)。
1. 2　色谱条件
色谱柱：HP-Wax (键合聚乙二醇，30m×0.32mm ×0.50μm)；柱温：50℃保持3min，以20 ℃/min升温至120 ℃保持4min，检测室温度：200℃，进样温度：200℃，载气：氮气，柱头压：68.95kPa，FDI检测器，顶空进样0.5 mL。
1. 3　溶液配制
对照溶液：称取299.8mg甲醇、500.2mg丙酮、499.6mg乙醇于100mL 容量瓶中，加DMF稀释至刻度，为对照贮备溶液，每1mL含2.998 mg甲醇、5.002mg丙酮、4.996mg乙醇。依次取0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL 对照贮备溶液分别至10 mL容量瓶中，加DMF稀释至刻度，制得系列浓度的对照溶液，每1mL含甲醇60.0、120、180、240、300μg；丙酮100、200、300、400、500 μg；乙醇100、200、300、400、500μg。
供试品溶液：称取2g供试品于20mL 容量瓶中，加DMF溶解并稀释至刻度。测定：精密量取对照溶液和供试品溶液各10mL，分别置于25mL顶空瓶中，在80℃的恒温箱中加热30min，取顶空气0.5mL进样。
2　结果与讨论
2. 1　专属性试验
      取甲醇、丙酮和乙醇依次进样，记录保留时间作为定性指标。色谱图中各成分峰的保留时间分别为2.577min、1. 913mim和3.048min，各成分峰之间峰分离度良好。
2. 2　线性范围
      取系列浓度的对照溶液(每1mL含甲醇60.0、120、180、240、300μg；丙酮100、200、300、400、500μg；乙醇100、200、300、400、500 μg)依次进样，记录峰面积。将峰面积对浓度进行回归，得回归方程。
2. 3　回收率试验
      精密称定法莫替丁样品(批号200302001)约0.5g，精密加入中浓度对照品溶液10mL，混匀，进样0.5mL，计算甲醇、丙酮和乙醇的平均回收率(n=3)分别为97.86%，98.16%和98.04%，RSD分别为1.34%，1.21%和0.94%，表明方法准确可靠。
2. 4　精密度试验
      取中浓度的对照溶液(每1mL含甲醇180μg、丙酮300μg和乙醇300μg)连续进样6次，记录色谱图，甲醇、丙酮和乙醇峰面积的RSD 分别为1.91%、1.34%和0.93% ( n=6)，表明精密度良好。
2. 5　最低检测限
      以信噪比3∶1( S/N=3)计算，甲醇、丙酮和乙醇的最低检测限分别为0.004%、0.002%和0.004%，根据人用药品注册技术要求协调会(简称ICH)对药品中限制使用溶剂残留限量规定为甲醇≤0.3%，丙酮和乙醇≤0.5%，表明本方法的检测灵敏度符合要求。
2. 6　样品测定结果
      取自制样品3批(批号200302001、200302002、200302003)及上市品1批，依法测定，用标准曲线回归方程计算甲醇、丙酮和乙醇的残留量，结果表明，3批自制样品及1批上市品中甲醇、丙酮和乙醇3种有机溶剂的残留量均符合ICH规定；自制样品所采用的合成工艺和技术路线与上市品有所不同，因此3种有机溶剂的残留量也不同，自制样品采用乙醇作为精制溶剂，故只检出乙醇；上市品则未检出乙醇，而甲醇和丙酮有一定的残留。
3　讨论与小结
      在中国药典2000年版二部，法莫替丁中甲醇的GC检查方法采用填充柱，本法采用毛细管柱法，由于毛细管柱法的分离度好，且顶空进样与溶液法直接进样相比具有灵敏度高、干扰小的优点，因此用于同时测定药物中的甲醇、丙酮、乙醇残留量，效果令人满意。DMF由于溶解性好，对药物和甲醇、丙酮、乙醇均有较好的溶解能力，因此，本法选用DMF作溶剂。所建立的甲醇、丙酮和乙醇残留量的GC检查方法，经方法学检验是准确可靠的，可用于法莫替丁中甲醇、丙酮和乙醇残留量的检查。
参考文献：[1] 中国药典(2000年版二部) [S] 2000，附录64。
          [2]王卫，药品中有机溶剂残留量及其测定[J]。天津药学，2001，13