穿梭箱实验
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【实验目的】
1. 了解穿梭箱实验(双向回避实验shuttle box test)的原理。
2. 掌握穿梭箱实验方法。
3. 观察实验动物建立条件反射过程中的学习、记忆能力。
【实验原理】
以光(或声)、电击为联合刺激,使实验动物由被动回避建立主动的条件反射。记录此条件反射建立过程中的主动回避反应指标可反应实验动物的学习、记忆能力的变化。
【实验动物】
大鼠或小鼠。
【实验器材】
穿梭箱由实验箱和自动记录打印装置组成。实验箱大小为50cm×l6cm×l8cm。箱底部格栅为可以通电的不锈钢棒,箱底中央部有一高1.2cm挡板,将箱底部分隔成左右两侧,即安全区和电击区。实验箱顶部有光源或(和)蜂鸣音控制器,自动记录打印装置可连续自动记录动物对电刺激[灯光和(或)蜂鸣器]的反应和潜伏期,并将结果打印出来。
【观察项目】
实验动物的学习能力:动物反应次数,动物主动回避次数,动物被动回避次数,动物主动回避率。实验动物的记忆能力:停止训练5~50天内,分2~3次检测上述指标。
【实验方法与步骤】
1. 训练 先让动物在测试箱中自由活动5min,以消除探究反射。将大鼠置于穿梭实验箱电击区。先给予条件刺激(灯光)和(或)蜂鸣音20s,后10s内同时给以电刺激(电击强度为30V,50Hz)。如果在亮灯10s内大鼠逃向安全区为主动回避反应,电击后才逃向安全区为被动回避反应。经过数次训练后,大鼠可逐渐形成主动回避性条件反应,从而获得记忆。每次训练20s,共训练30~50次。即设定循环次数为30~50次。
2. 测试 做实验时,将大鼠置于穿梭箱电击区,记录遭受电击的次数(被动回避的次 数),该值与设定循环次数之差即为主动回避次数;刺激时间(指动物在被动回避过程中受到电刺激的时间和),该值越小,说明动物主动回避反应越迅速。
【注意事项】
1. 保持实验室安静,光线不宜过强,尽量避免给动物额外刺激。
2. 实验中应及时清除铜栅上的粪便等杂物,以免影响刺激鼠的电流强度。
3. 动物在24h内有其活动周期,故每次实验应选择同一时间(上午8~12点或下午1~4点),前后2天的实验要在同一时间内完成。
【对穿梭箱实验方法的评价】
简单易行,但动物的反应差异性较大,只能用于初筛实验。
思 考 题
通过穿梭箱实验,如何来评估小鼠的学习记忆成绩?