细菌的人工培养――培养基
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培养基是人工配制的适合于细菌生长繁殖的营养基质。培养基按其理化性状可分为液体、半固体和固体三大类。液体培养基可供细菌增菌及鉴定使用;在液体培养基中加入0.2%~0.5%的琼脂即成为半固体培养基,可用于细菌动力的观察及保存菌种;如琼脂量为2%~3%时,即为固体培养基,可供细菌的分离培养、保存菌种等使用。按用途的不同可将培养基分为五类:
(一)基础培养基
含有一般细菌生长繁殖所需要的基本营养成分。最常用的是肉汤培养基和普通琼脂培养基。其成分是牛肉膏或肉汤、蛋白胨、氯化钠、水等。可供大多数细菌培养用。
(二)营养培养基
在基础培养基中加入葡萄糖、血液、血清、酵母浸液等营养物质,医学|教育网搜集整理即成营养培养基。专供营养要求较高的或有特殊营养需求的细菌生长。如肺炎链球菌的生长需要含有血液、血清;结核分枝杆菌的生长需要加入鸡蛋、马铃薯、甘油等。最常用的营养培养基是血琼脂平板。
(三)选择培养基
根据人为的目的,在培养基中加入某些化学物质,以抑制某些细菌生长、促进另一类细菌的生长繁殖,从而将目的菌株选择出来,这类培养基叫选择培养基。如SS琼脂培养基中含有胆盐、煌绿、枸橼酸,可抑制革兰阳性球菌和部分革兰阴性菌生长繁殖,而对沙门菌和志贺菌的生长没有影响,故该培养基常用于肠道致病菌的分离与培养。
(四)鉴别培养基
以培养和鉴别细菌为目的而配制的培养基称鉴别培养基。它是根据细菌分解糖和蛋白质能力的不同,在培养基中加入特定的作用底物和指示剂,接种待检细菌培养后,观察细菌分解底物的情况,从而鉴别细菌。各种糖发酵管、硫化氢管、三糖铁培养基等均属鉴别培养基。
(五)厌氧培养基
专供培养厌氧菌用的无氧环境的培养基称厌氧培养基。一般采用两种方法:医学|教育网搜集整理①将培养基中加入还原剂以降低培养基的氧化还原电势,并用石蜡或凡士林封口,隔绝空气。常用的有疱肉培养基,是在肉浸液中加入煮过的肉渣,肉渣中含有不饱和脂肪酸和谷胱甘肽等还原物质,在氧化还原反应中造成厌氧环境。②将细菌接种在固体琼脂培养基上,然后放在无氧环境中培养,如厌氧袋、厌氧箱、厌氧罐等培养法。