直接抗球蛋白试验在临床中的应用
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2003年1月—2007年6月我们用直接抗球蛋白试验（DAT）检测出了296份阳性标本，其中有血液系统，肝脏，肾脏，风湿类及感染性疾病与骨髓、实体器官移植后等病例。现将结果报告如下。
1 材料与方法
1.1 样本 296份DAT阳性样本来源于本院住院患者。
1.2 试剂与仪器 LISS�Coombs凝胶卡与专用离心机（瑞士达亚美公司）。
1.3 方法 将0�8%红细胞悬液50 μl加入LISS�Coombs凝胶卡管中，1 500r/min，离心10 min，观察结果。
2 结果
DAT阳性样本中，单纯诊断为自身免疫性溶血性贫血（AIHA）167例，阳性率为64%； 其它系统疾病并发AIHA 129例，其中风湿类疾病48例（系统性红斑狼疮40例，结缔组织病3例，淋巴瘤2例，胸腺瘤1例，类风湿关节炎1例，多发性骨髓瘤1例），阳性率为44%。血液系统疾病28例（白血病12例，ITP 7例，再生障碍性贫血6例，埃文斯综合症3例），阳性率为6�3%。肝脏疾病16例，尿毒症10例，感染性疾病19例，新生儿溶血病3例，骨髓移植2例，肾移植术后2例，肝豆状核变性1例。
3 讨论
本研究发现溶血性贫血和风湿类疾病直抗阳性率分别为64%和44%，明显高于其它种类的疾病。我们还发现AIHA既可作为原发性疾病单独存在，也可继发于其它疾病，如风湿类疾病、血液系统疾病，和骨髓及实体器官移植术后。自身抗体产生的机制不是十分清楚，有报道认为病毒可直接损伤红细胞膜导致溶血，或病毒感染引起免疫功能紊乱，导致自身免疫的发生和发展［1］。我们没有对红细胞上的自身抗体进行放散及特异性鉴定，但对10例不规则抗体阳性标本做抗体鉴定发现，9例为非特异性，1例为抗e特异性的自身抗体。DAT阳性伴溶血常出现在新生儿溶血性疾病，药物性溶血性贫血，急性溶血性输血反应，迟发性溶血性输血反应和AIHA等疾病。
DAT阳性伴有或无溶血可出现在外源性免疫球蛋白输注、近期造血干细胞移植、近期的实体器官移植、系统性红斑狼疮、传染性的单核细胞增多症、淋巴系统增生性疾病。因此，DAT阳性，要进一步寻找是否有实验室或临床上的溶血证据。临床上DAT阳性最常见的原因是AIHA，温抗体型AIHA通常由IgG抗体引起，而冷抗体型AIHA通常由IgM抗体引起，补体因IgM抗体的影响而结合到红细胞膜上。前者和抗�IgG性质抗球蛋白试剂呈阳性反应，后者和抗�C3d抗人球蛋白试剂呈阳性反应。
有报道认为在有些情况下，可出现DAT阳性而没有溶血的症状，如免疫系统功能紊乱或炎症状态导致非特异抗体吸附在红细胞膜上［2，3］。这些IgG抗体并非免疫性的结合在红细胞膜上不能识别和结合特异性红细胞抗原，通常不导致溶血。其发生率在健康献血者是1∶ 14 000，住院患者为1% —15%。
如果患者在前3个月接受了输血，DAT阳性的原因为同种异体免疫反应针对输入的红细胞抗原，该抗原也是受者所缺乏的抗原。或输入了包含有ABO， Rh或其它红细胞抗原的抗体，这些被动获得的抗体的滴度随时间延长逐渐减低，DAT将变为阴性。
我们还发现了2名造血干细胞移植，2例实体器官移植的患者，移植后DAT呈阳性，出现的机理为同种异体器官或干细胞中的淋巴细胞能产生针对受者红细胞抗原的特异性抗体。供者抗体产生的淋巴细胞和受者淋巴细胞形成的嵌合体存在时间长短决定DAT阳性的持续时间。
参考文献
［1］钟珊. 晚期肝病患者非急性出血性贫血原因探讨［J］重庆医科大学学报，2006，19—20
［2］Freedman J. The significance of complement on the red cell surface［J］. Transfus Med Rev， 1987，1(1):58—70
［3］Manuel ZJ， Yazer MH. The role of the Coombs test in evaluating hemolysis in adults［J］. CMAJ， 2006 ， 174(3):305—307
