下呼吸道标本的细菌学检验
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1. 下呼吸道标本培养常见病原菌
革兰阳性菌 革兰阴性菌
金黄色葡萄球菌 脑膜炎奈瑟氏菌
化脓性链球菌 流感嗜血杆菌
肺炎链球菌 肠杆菌科细菌
结核分支杆菌 非发酵菌
白喉棒状杆菌 嗜肺军团菌
假丝酵母菌
2.标本收集:
2.1下呼吸道标本采集的基本要求是采集深部的痰液,具体方法有以下几种:1.自然咯痰法2.气管镜采集法3.小儿取痰法4.气管穿刺法5.胃内采痰法。
2.2 标本采集的注意事项
2.2.1标本采集以晨痰为佳,咳前应充分嗽口,减少口腔正常菌群的污染。
2.2.2标本采集后应及时送检,以防某些细菌在外环境中死亡。做结核分枝杆菌或真菌培养的痰液如不能及时送检,应放入4℃冰箱,以免杂菌生长。
3.检验步骤:
3.1一般细菌涂片检查 挑取痰液的脓性或带血部分放在两张玻片中,置室温自然干燥,经火焰固定后,做革兰氏染色,另一张根据检验需要做抗酸染色或其他染色。如标本中每个低倍视野内鳞状上皮细胞多于25个,脓细胞又少于10个,并找不到病变部分,表示标本来自唾液,标本不合格,不必进一步检查,要求重新送检。
3.2分离培养 一般细菌培养分别接种于血平板、麦康凯、巧克力平板,巧克力应置于CO2环境中35℃培养18~24小时。
4.检验流程:
痰液及支气管分泌物
培养检查
一般细菌 真菌培养 结核分枝杆菌 涂片检查
血平板、麦康凯 沙氏培养基 罗氏培养基
巧克力平板(5~10%CO2)
观察菌落 革兰氏染色 涂片检查 革兰氏染色 抗酸染色
革兰氏染色、相关酶的试验 Vitek-32鉴定、ATB Fungus
API Aux
真菌及一般细菌 抗酸杆菌
Vitek-32鉴定、药敏
BD凤凰鉴定、药敏 鉴定及药敏试验
确定报告
5.报告结果:检出细菌,应报告菌名和药敏结果。