ABBOTT CELL-DYN 1600型血细胞分析仪直方图分析
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安徽省蚌埠市第一人民医院 陶志勇
在Abbott Cell-DYD 1600型血细胞分析仪的应用中,血细胞分布直方图具有直观性,对分析病人标本和对仪器状态及性能都很有帮助。
一,白细胞分布直方图
电阻法白细胞计数和分类的基本原理如下:在溶血素(Lyse)的作用下,白细胞在高渗和化学作用的共同影响下,膜的透性增加,细胞内液逸出,而细胞核及细胞器却不能通过胞膜,皱缩的膜包裹细胞核及胞质颗粒形成一个“溶血素作用后细胞”(lyse modified cell,本文简称为LMC )。LMC 通过计数孔,在孔的内外有电场存在,每一个大小不同的LMC 通过电场都产生一个与其体积成正比的电脉冲,通过对收集到的脉冲信号的分析,从而计出细胞的数量,并且能够对白细胞跟据脉冲大小的分布计算出白细胞的分类(其实是LMC 的脉冲大小)。值得注意的是,电阻法对白细胞的分类根据的是LMC 的体积,而不是根据生理状态下的白细胞体积。LMC 与生理条件下的体积分布对照如下:
1,溶血素对各类白细胞的作用:
淋巴细胞:细胞体积小,胞核单一且较小,胞浆量少,胞质颗粒少。经溶血素作用后形成一个由胞膜紧紧裹在核上的LMC ,体积在35~98fl,CD1600在三分类上属LYM。
嗜碱性粒细胞:细胞体积较小,胞核单一且较小,胞浆量极少,胞浆中有嗜碱性颗粒。经溶血素作用后形成一个由胞膜紧紧裹在核及上的LMC ,体积在98~135fl,CD1600在三分类上并入MID。
嗜酸性粒细胞:细胞体积较大,胞核多为两个,胞浆量较多,胞浆有较多的粗大嗜酸性粒颗粒。经溶血素作用后形成一个由胞膜裹在核及胞质颗粒上的LMC ,体积在98~135fl,CD1600在三分类上并入MID。
单核细胞:生理状态下,细胞体积最大,胞核单一,较大,在三维空间上有折皱,胞浆量中等,颗粒较少。经溶血素作用后形成一个由胞膜裹在核上的一个中等大小的LMC ,体积在98~135fl,CD1600在三分类上并入MID。
中性粒细胞:生理状态下,细胞体积较大,分叶核,胞浆丰富,有大量中性颗粒。经溶血素作用后,形成一个由胞膜核及中性颗粒上的LMC ,体积在135~350fl,CD1600在三分类上属GRAN。
白细胞分布直方图的模式:
白细胞分布直方图是以“溶血素作用后细胞”体积为横轴,以数量为纵轴。横轴分为256个通道,每通道为1.37fl,收集到的相应的脉冲数量在坐标系中描点,从而绘出一条连续的曲线。理想的白细胞曲线是由三个连续的正态分布形成的曲线。
2,白细胞的干扰“R”的分布。类似于“R0 、R1 、R2 、R3 、R4及Rm”这样的标记经常会出现在CD1600的报告单的WBC计数及分类的数值结果旁边,这些R的标记是对白细胞分布中的某些区域数值异常所进行的提示。具体R的分布见下图:
3, 白细胞分类与计数中出现的异常情况:
3.1, 中介值细胞区域出异常白细胞峰。
3.2, 由大量白血病细胞出现形成的单一峰。
3.3,由堵孔或半堵孔引起的干扰峰及判断。
由于计数用的宝石孔被蛋白质块、细胞碎片、纤维、结晶等堵塞或半堵塞,白细胞计数会出现非常严重的干扰,表现为白细胞总数假性增高,具体反映在直方图上如下图标示,而在数值上,淋巴细胞计数增高,百分比加大,高达80%以上,有R0, R1, R2, Rm提示出现。
3.3.1,出现下图所示峰形一般再结合计数时间即可做出白细胞宝石孔堵孔的判断。
3.3.2 如果出现下图所示峰形,考虑到试剂质量不高的情况下,测试婴幼儿标本时,从直方图及数值上不易与半堵孔的情况区别,一般也应清洗机器后复查。
3.3 白细胞计数Count Over Range
二,红细胞分布直方图
相对于白细胞的分布直方图,红细胞分布直方图就显得简单和易于理解。同白细胞分布直方图的原理相同,横轴为红细胞体积,纵轴则代表了数量。
横轴分为256个通道,每通道为1 fl,收集到的相应的脉冲数量在坐标系中描点,从而绘出一条连续的曲线。理想的红细胞曲线是一个正态分布的曲线。
1, 下面的图标示了三种不同的RBC分布模式图。通过和正常RBC分布对照,当出现小细胞或大细胞分布时,能直观地辨别出来。
2, 下图标示是由不同红细胞亚群引起一比较少见的特殊峰形:
3, 下图标示了某些情况下过高的WBC或PLT计数对红细胞分布直方图的干扰。
三,血小板分布直方图
血小板分布直方图横轴分为256个通道,每通道为0.137 fl,收集到的相应的脉冲数量在坐标系中描点,从而绘出一条连续的曲线。
1, 血小板分布直方图的理想模式
2, 血小板分布直方图的干扰情况
2.1,血小板受到体积极小的红细胞影响,会使PLT的计数假性增高。
2.2,血小板受到静电干扰,会使PLT的计数假性增高。
2.3,血小板在高值区域受到相关因素的影响,使PLT的计数假性增高。
关于Cell-dyn 1600血细胞分析仪的细胞分布直方图还有其它一些有用的信息,有助于我们对血常规结果有更好的理解。