尿液分析仪法与显微镜结合使用的重要性
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随着现代尿液的普遍使用尿液分析既简单又快捷为临床诊断提供了方便与诊断依据,因此使一些检验人员在实际工作中放松了对尿液沉渣镜检的重视,忽视了显微镜检测尿液有形成分这一金标准。如何将三者(沉渣法、镜检法、化学法)有机结合起来,为临床提供更为精准可靠的结果。然而现代技术的发展却不能代替传统的显微镜对尿液有形成分(细胞、管型、结晶、肿瘤细胞等)的检测,并且由于尿液分析仪检测与显微镜下的检测原理的不同,报告方式也不同。仪器法只是一个筛选实验,尿液的显微镜检测在尿液检测中仍是一个重要的环节。因此在尿液检测中使用显微镜就显得尤为重要。具体分析如下:
1.检测分析
1.1红细胞:当沉渣法和镜检法检测一致时,有时会出现化学法阳性。原因是由于化学法测的是破损(由于尿液中红细胞被破坏而释放出血红蛋白)和完整的红细胞,可见于肾病患者。而其他两种方法检测的是完整的红细胞。在此须指出的是当化学法阴性而镜检法阳性时,可发生在尿液中含大量维生素c或试纸条失效时,若使用尿十一项时,可通过观察维生素c的含量来加以判断。
1.2白细胞:当沉渣法和镜检法检测都为阴性化学法阳性时,原因是由于尿液在膀胱储存时间过长或其他原因致使白细胞破坏,中性粒细胞酯酶释放到尿中所致。当其他两种方法检测阳性而化学法检测阴性时,这种情形多发生在肾移植患者发生排异反应时,尿中以淋巴细胞为主。另外尿液中以单核细胞为主时也会出现此结果,原因是化学法检测 的是尿中完整的 及溶解的中性粒细胞,而与淋巴细胞及单核细胞不起反应。
1.3病理管型:沉渣法和镜检法一致性差是因为标本中有粘液丝时,经常吸附尿液中的有形成分而被误认为病理管型,脓细胞和体积较大的纤维丝也会干扰病理管型的区分。
1.4类酵母细胞:在沉渣仪上,它的前向散射光与红细胞相似,荧光强度介于红细胞和白细胞之间,因此类酵母细胞容易和红细胞混淆,尤其是化学法测定潜血阴性时,沉渣法测得红细胞在100以上时,镜检有可能发现类酵母细胞。
1.5结晶:沉渣法和镜检法一致性也差是因为沉渣仪上结晶散点图的位置紧靠红细胞,容易和红细胞发生交叉。
以上综述体现当化学法和沉渣法测定结果为阴性时,可以不做显微镜检;化学法和沉渣法检出红细胞与白细胞一致时,也可以不做镜检;化学法和沉渣法检出红细胞与白细胞不一致时必须做显微镜检,并且以显微镜检为准;化学法和沉渣法测定红细胞与白细胞阴性或一致而任何一项沉渣法检出阳性时,一定要做显微镜镜检加以确认;化学法和沉渣法都是筛选试验,显微镜检查才是确诊试验。
1.1 干化学法检查尿中白细胞试剂带的主要成分是吲哚酚酯、重氮盐。粒细胞胞浆内含有酯酶,此酶可作用于模块中的吲哚酚酯,使其产生吲哚酚,后者发生氧化缩合反应或与重氮盐反应形成紫色缩合物,其颜色深浅与细胞的多少呈比例关系,此种方法简便、检测快捷,但下列因素对它的检查结果的准确性都可能造成影响:(1)不同型号的试剂带测定尿白细胞的敏感度不同,使用时必须注意批间差异,以免因试剂带不同而引起同一标本测定结果的差异。然而,镜检法就不存在此问题,它对同一份标本检测只存在检测者之间的技术差异。(2)尿液标本必须新鲜,留尿后必须立即测定,以免白细胞破坏,导致干化学法与镜检法的实验误差。(3)使用某些药物时,可产生假阳性,尿蛋白>5g/L或尿液中含有大剂量头孢氨苄、庆大霉素等药物时,可使结果偏低或出现假阴性,而镜检法受到的影响不大。(4)由于尿液在膀胱中贮存时间过长或标本放置时间延长,导致白细胞破坏,酯酶释放到尿液中,造成干化学法阳性,镜检阴性的所谓假阳性现象。(5)干化学法只能测定粒细胞,不与淋巴细胞反应,所以它不像镜检法那样,不论粒细胞、淋巴细胞都能检测得到。
1.2 干化学法检测尿液中尿红细胞试剂带中的主要试剂成分是过氧化物底物和邻甲联苯胺(或四甲替联苯胺)。尿液中的血红蛋白或其破坏释放的游离血红蛋白均含有亚铁血红素,后者具有过氧化酶样活性,可使无色的邻甲联苯胺(或四甲替联苯胺)脱氢变成蓝色的邻甲联苯胺(或四甲替联苯胺)物质。此法简便、检测快捷,但下列因素对它的检测结果都可能造成影响:(1)不同型号的试剂带测定尿红细胞的敏感度不同,使用时必须注意批间差异,以免因试剂不同而引起同一份标本测定结果的差异,而镜检法不存在此问题,它对同一份标本检测只存在检测者之间的技术差异。(2)尿液标本必须新鲜,留尿后尽量立即测定,以免红细胞破坏,导致干化学法与镜检法实验误差。干化学法既可与完整的红细胞反应,又能测定游离的血红蛋白;而镜检法只能检测红细胞。(3)尿液中含有对热不稳酶,肌红蛋白或菌尿可引起干化学法测定尿红细胞的假阳性;尿液中有大量维生素C的存在,可竞争性抑制反应致使干化学法产生假阴性,而以上现象对镜检法的检测影响不大。(4)肾病患者,红细胞在肾脏或泌尿道破坏或尿比重过低,尿pH值偏高,均易造成红细胞破坏,造成所谓红细胞干化学检测的“假阳性”现象。
1.3 干化学法与镜检法的比较 干化学法对管型、结晶、肿瘤细胞是无法检测的这也是它的不足之处,而镜检法能直接显示有形成分(如血细胞、管型及各种结晶、肿瘤细胞),对泌尿系统疾病的诊断、疗效的观察有重要的意义。 通过以上的分析以及多年的临床实践证明,尿液的显微镜检测法仍然是诊断泌尿系统疾病的重要指标之一,目前实验室常用的尿液分析仪检查结果不能完全替代镜检法。特别是对肾科患者的尿液,以镜检结果为诊断依据和观察疗效指标,所以对尿液的常规检测,最好是将镜检法与尿液的一般性状检查、化学检查互为补充和参照,还能为后者提供未发现的异常变化,这样对于泌尿系统疾病的诊断、鉴别诊断都有重要的意义。因此,尿镜检法在尿液的检测中具有尿液分析仪检测法所不可取代的重要性。