原理
将培养物放在显微镜的载物台上,打开电源,选择合适的镜头,聚焦于标本。如果必要的话,将聚光器和相差环调节在中心。
材料与仪器
倒置显微镜 擦镜纸
步骤
1. 确保显微镜(配有相差10×、20× 或40× 的物镜及聚光器和合适的相差环)洁净(用 70 % 乙醇擦拭载物台。如果有必要,用擦镜纸清洁物镜)。
2. 打开电源,将灯光强度从最低开始调至合适的强度,而不是直接打到强光。
3. 检查光源与聚光器的衔接:
(a)将一张染色切片、培养瓶或培养皿放在载物台上;
(b)关闭视场光圈;
(c)聚焦在可变光阑上;
(d)将可变光阑成像调整到视野的中央。
4. 将相差环调至中央:
(a)如果显微镜配有相差望远镜,将之插入标准目镜位置,然后聚焦于相差环,检査聚光器环(黑色背景中的白环)是否与物镜环(白色背景中的黑环)同轴;
(b)如果没有相差望远镜,则将染色的标本换为没有染色的培养物(活的或固定的培养物),重新聚焦,调整相差环,直到获得最优对比。
5. 观察细胞。10× 相差物镜作为常规观察已足够,4× 相差物镜不能提供足够的细节资料,而高于 10× 的放大倍数则限制了观察区域。
(a)注意生长期(例如,稀疏、亚汇合、汇合、致密);
(b)注意细胞状态(例如,清亮、透明或有颗粒、有空泡等)。
6. 检査培养基的清亮程度(例如,无碎片、漂浮的颗粒、污染迹象等),根据需要选择一个放大倍数更高的物镜。
7. 记录观察的结果。
8. 旋低变阻器(把灯光调暗),关掉电源。
9. 将培养液放回孵箱,或放在超净台上进行无菌操作。
2. 打开电源,将灯光强度从最低开始调至合适的强度,而不是直接打到强光。
3. 检查光源与聚光器的衔接:
(a)将一张染色切片、培养瓶或培养皿放在载物台上;
(b)关闭视场光圈;
(c)聚焦在可变光阑上;
(d)将可变光阑成像调整到视野的中央。
4. 将相差环调至中央:
(a)如果显微镜配有相差望远镜,将之插入标准目镜位置,然后聚焦于相差环,检査聚光器环(黑色背景中的白环)是否与物镜环(白色背景中的黑环)同轴;
(b)如果没有相差望远镜,则将染色的标本换为没有染色的培养物(活的或固定的培养物),重新聚焦,调整相差环,直到获得最优对比。
5. 观察细胞。10× 相差物镜作为常规观察已足够,4× 相差物镜不能提供足够的细节资料,而高于 10× 的放大倍数则限制了观察区域。
(a)注意生长期(例如,稀疏、亚汇合、汇合、致密);
(b)注意细胞状态(例如,清亮、透明或有颗粒、有空泡等)。
6. 检査培养基的清亮程度(例如,无碎片、漂浮的颗粒、污染迹象等),根据需要选择一个放大倍数更高的物镜。
7. 记录观察的结果。
8. 旋低变阻器(把灯光调暗),关掉电源。
9. 将培养液放回孵箱,或放在超净台上进行无菌操作。
来源:丁香实验