如何分离标本中污染了变形杆菌的其他细菌

       一、如何从变形杆菌中分离G+球菌？

       A、用棉签沾无水乙醇涂布于MH平板上，置入温箱中烘干，让琼脂脱水。将球菌接种到该平板上即可。此平板可抑制变形杆菌的迁徙生长。

       B、在分离平板上贴氨曲南纸片可以分出G+菌。

       二、同一标本中同时存在金葡和变形杆菌的分离方法？

       A、解决的办法：以前曾经讨论过多种解决奇异变形杆菌和其他细菌混合生长时的单菌落分离方法，如加大琼脂硬度、接种高盐肉汤等。我个人比较喜欢贴药敏纸片的方法。挑取含有金葡菌的菌苔划线分离后，在第一区和第二区的交界处贴一张头孢西丁纸片。经培养后，头孢西丁纸片周围生长的奇异变形杆菌被抑制，而金葡菌仍可以生长。此时应即使挑取抑菌圈中的金葡菌进行纯分离，从而达到将两种细菌完全分离的目的。

       B、贴氨曲南纸片可抑制变形杆菌生长，而金葡菌耐药，这样就可以把金葡分出来。

       C、分纯方法应根据目标菌不同而异。我喜欢用时间差的方发来分纯，这样不会使目标菌受抑制。这要看那株变形杆菌的迁徙速度了，一般4-6h可以分离到目标菌。

       D、我用过一种弱选择的麦慷慨，成品的，葡萄球菌可以生长，变形迁徙生长可以被抑制，oxoid的。

       评价一：老师的方法不错，有空试试！我试过用时间差的方法，比较麻烦．操作过程如下：挑起混合菌分区接种于血平板上，待平板上刚长出小菌落后，挑取菌落涂片染色，找到革兰阳性球菌就立刻转种．这个过程比较麻烦，一定要在变形菌没有明显扩大的时候挑取菌落涂片，培养时间一般４～６小时，这个时间内葡萄球菌和变形菌只形成小菌落，而变形还没有明显迁徙．涂片时可以只看湿片．

       评价二：我认为几种方法各有长处：如果变形杆菌生长慢的话，时间差法很好，可以节省时间，早些发出报告；如果变形生长快，只能用倾倒酒精法或贴纸片法，贴纸片法不是万能的，如都敏感或都耐药，很难分离出纯菌，酒精法没试过不知效果如何：至于增加琼脂硬度，我觉得有些麻烦，还要单独配一些这样平皿（是现配还是提前备一些？）

       三、总结解决的办法有：

       1、贴药敏纸片的方法。挑取含有金葡菌的菌苔划线分离后，在第一区和第二区的交界处贴一张头孢西丁纸片。经培养后，头孢西丁纸片周围生长的奇异变形杆菌被抑制，而金葡菌仍可以生长。此时应即使挑取抑菌圈中的金葡菌进行纯分离，从而达到将两种细菌完全分离的目的。

       2、配制平皿时混入少许95%的酒精，混匀后倒平板；或者在血平板上倒入95%酒精后，把剩余酒精倒掉，平板表面干后即可。用于分离金葡菌和变形杆菌。酒精主要起抑制变形杆菌的迁徙作用。

       注：酒精平板：90mm平板加无水乙醇0.5ml加20ml血液琼脂基础（最好用进口的哥伦比亚琼脂配制）或Ｍ－Ｈ琼脂基础。

       3、加了结晶紫的麦康凯葡萄球菌不长，变形不迁徙。另外，提高血平板的琼脂含量到4%，也可以将二者分开。

       4、时间差的方法，操作过程如下：挑起混合菌分区接种于血平板上，待平板上刚长出小菌落后，挑取菌落涂片染色，找到革兰阳性球菌就立刻转种。这个过程比较麻烦，一定要在变形菌没有明显扩大的时候挑取菌落涂片，培养时间一般４～６小时，这个时间内葡萄球菌和变形菌只形成小菌落，而变形还没有明显迁徙．涂片时可以只看湿片。

       5、大肠等其它肠杆菌科细菌，就分个ss，可以将二者区分开！

 

                                                                                                                                                                 文章来源：阳光检验