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血液分析仪堵孔的机理分析

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最近,很多人询问堵孔大多是顽固性堵孔如何处理的问题,并且都询问是否与试剂有关,并且所有咨询的问题都涉及几家销售量较大的厂家试剂,下面详细阐述一下:

1、所有堵孔的发生都跟采血的手法是否正确操作有关,携带大量的上皮细胞组织或者棉絮纤维都很容易堵孔,也很难排除,在大直径的孔有时候会看到棉絮等物质,像F820很多医院都在反冲的时候见到大团的棉絮从孔中冲出,这就是很好的例证,无论全自动还是半自动这样的问题大多出现在预稀释标本中,全血标本几乎没有。

2、抗凝出现问题,要么是抗凝比例不对(过高会导致卫星现象,显微镜下能看到大细胞的周围卫星很多小细胞,造成细胞体积巨大而且还很难溶解),放置时间过短也是原因之一,这也是在25分钟之内测试分类不好血小板不稳的重要原因,EDTA抗凝剂与血小板凝血因子反应结合需要时间,这个时间随着温度的升高而缩短,这也就是天气变冷的时候容易出现问题的原因。

3、凝血和混匀,血液凝固,混匀不好,抗凝剂使用不正确(枸橼酸钠、草酸等非血常规抗凝剂长时间使用会导致堵孔),这些想必大家都知道。

以上这些常识性的东西大家都很清楚,这些情况一次没有掌握或者处理好不会当时或者这个标本做完后就造成堵孔,而是有个时间的累计,多次出现上述情况才会发生的。下面还有几种机理:

4、WBC通道的堵孔机理:溶血剂问题,溶血不足是主要原因,要注意的是明显的溶血不足会显示出HGB的增高和WBC的上升,很容易给人们警示,这里说的是轻微溶血不足,在WBC和HGB上看不出数值的变化或者很轻微,WBC图形上淋巴峰值前会有不规则上升曲线,这就要引起足够的警惕了,一般这种情况出现,30天之内就会发生严重的堵孔。主要原因是溶血剂破坏红细胞不完全或者红细胞碎片发生粘连聚集造成的,这种情况持续长时间就会在小孔上附着,小孔上附着这些细胞碎片以及蛋白沉积就会像盖房子的水泥一样,一层一层的越积越厚,等怀疑可能堵孔再做浓缩清理就已经很难清除了。稀释液问题,稀释液的理化指标不合格,造成细胞无法正确稀释间隔,游离不好就会造成细胞聚集,在直方图上表现明显,但出现堵孔问题往往在直方图上无法看出问题,原因是更换试剂时都作了相应的灵敏度和增益的调整,在定标系数上也作了相应的调整,这样在直方图上根本无法看出问题所在,更换理化指标稍好的稀释液就会发现直方图明显的变化,这一点要引起重视,这些试剂往往是销售区域很小的厂家的产品,销售医院不多,且设备的养护也都是以保修名义自己承担的。

5、RBC通道的堵孔机理:血液标本经过成千上万倍的稀释后在红细胞计数池进行电阻法计数,在稀释过程中除了稀释液没有其他的试剂干预。大家知道白细胞池经过溶血剂的作用能多少消除一些蛋白和碎片的干扰,而且往往是分配了白细胞的标本且加入溶血剂和气泡之类混合后才开始在红细胞池进行分配和稀释的,而白细胞和红细胞池是同时计数的,这样红细胞池的蛋白碎片悬浮活动力就要高于白细胞池,而且从比例上讲这些蛋白和碎片的比例也要高于白细胞池,这就是红细胞堵孔的一个主要原因。

6、负压不足,有人说负压不足会报警的。要知道仪器的报警电路都是有一个范围的,长期处于负压下限,或者认为调整了负压报警限制都会导致实际负压不足。负压不足导致堵孔的原因很好理解,大家都知道自来水是靠水泵来提供足够的压力供给千家万户的,没听说自来水管道会堵或者管道内壁有什么附着物,但下水道往往都是靠自然高度排出的,水流的速度自然很低,这就给下水管道内壁附着提供了很好的条件,所以大家看到的是下水管道内壁污垢很厚。在血液分析仪上,负压不足就会给蛋白、碎片附着在小孔上提供了有利的条件。所以,计数负压,排空负压的监测调整一般在上限好一些,这样留有的余地会大一些。经常有人说小孔没有堵,我处理过也检查过,绝对可以肯定,但为什么就是报堵孔或者现象就是堵孔呢,先前这个问题问得最多的就是F820,其实就是负压不足造成的。

7、清洗剂问题,清洗剂的作用是清除小孔和管道的蛋白、碎片附着,如果清洗剂效果不好就起不到应有的作用,势必造成久后堵孔,这些清洗剂往往是每标本测试后都要用到,理化指标太高就会造成清洗剂的泡沫或者其他成分清理不干净 反而会影响计数,理化指标太低,起不到效果,这也就是清洗剂仅次于稀释液复杂程度的原因,国内试剂配套往往是模仿,很少有人去做基础验证和证据分析。还有的仪器没有普通的清洗剂,只有浓缩清洗剂,这种清洗剂往往被人用次氯酸钠替代了,过滤不好甚至根本就没有过滤反而会造成大颗粒堵孔,冲洗不干净会影响计数,而且会腐蚀管道和相关池、阀、泵等部件。有些仪器不仅有普通清洗剂,还有浓缩清洗剂,更有其他名目的清洗剂,分别在不同的部件上使用。遇到一个客户关机前使用浓缩液后,第二天再开机反而本底很久不能通过,试剂都是仪器厂家的,我看了一下,医院由于嫌稀释血结果不可靠,都采用全血测试,就告诉他们,每天关机不要采用浓缩液连续一周,均没有发生早上开机不通过现象,然后隔一天用浓缩液,就发现使用浓缩液的第二天就会本底不过,至于这批浓缩液出了什么问题我们不追究,这里仅给大家一个考虑问题的思路。还有的所谓浓缩液不用还好点儿,用上了不久反而会堵孔,当然,这些都需要反复验证才可以结论。

 

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