【交流】胶体金制金及标记后纯化浓缩耗材仪器选择
丁香园论坛
1903
新加入的公司准备购买仪器，顺便做了个小小的总结，如大家有什么好的方法也可以补充下。
一、制金
1、热源：电炉、磁力加热搅拌器、红外线加热板
反应容器：普通锥形瓶
优点：器材简便易得、易大量生产
缺点：a、温度不精确
b、受热不均，可能导致金的颗粒大小不一
c、制金过程中，水分蒸发较多，导致反应体系中的物质浓度有所变化，在少量金的制备过程中这个缺点尤其突出，有的实验室采用在锥形瓶外接冷凝管的方式来消除这种影响
2、热源：套式恒温加热器
反应容器：圆底烧瓶
优点：器材简便易得、易大量生产、部分的套式恒温加热器有温控功能
缺点：a、未见有搅拌功能的套式恒温加热器，反应器中的溶液温度均一程度值得怀疑
b、同1－c
c、不同大小的烧瓶需不同规格的加热器
3、热源：恒温加热水槽、加热锅
反应容器：普通锥形瓶
优点：a、器材简便易得
b、可以实现精确温控且锥形瓶的受热面积最大
c、反应过程中，锥形瓶内的溶液不沸腾，将蒸发量将至最低，也可以加装冷凝管
d、可利用水槽的搅拌功能，将转子放入锥形瓶中，让反应在搅拌下进行
缺点：a、水浴槽的大小将限制锥形瓶的大小，每一次产量有限（500mL-1L），若要扩大生产则需定制特殊的水浴槽，而过大的水浴槽温控又可能受限
4、热源：加热套
反应容器：无特定要求
优点：a、可温度控制，器皿受热均匀
缺点：a、一般生物试验室可能没有
b、未见有搅拌功能加热套
以上各种制金设备所制金的颗粒大小均一度的比较没查到相关的资料，一切可能还要由粒径分析仪的结果决定。
二、胶体金－抗体复合物的纯化及浓缩
1、离心纯化浓缩
设备：高速离心机
优点：没什么特别的优点
缺点：a、离心条件较猛烈，可能会遇到挂壁的现象
b、大批量生产时，同一批胶体金在标记完毕后需分多次离心
c、离心完毕后倾倒上清液时需小心，否则沉淀的金有再混入溶液的可能
2、超滤
2.1、设备：超滤膜包、超滤柱
优点：a、条件温和
b、可以在超滤浓缩的同时继续添加待浓缩的液体，或者在浓缩的同时对金进行洗涤除去游离的抗体
c、操作相对简便
d、超滤包可以反复使用，寿命2-3年
缺点：a、一根超滤柱只能对应一种产品
2.2、设备：Amicon搅拌式超滤装置、高压气体装置
优点：a、条件温和
c、操作相对简便
缺点：a、体积有限
b、浓缩和洗涤不能同时进行
c、超滤膜为耗材
三、水源
超纯水或三蒸水，所需仪器为超纯水或三蒸水机
四、玻璃器皿的处理
1、制金、标记、保存等所用的玻璃仪器在使用前需进行泡酸处理以除去表面的杂质，即使用重铬酸钾－硫酸溶液处理
2、将器皿内壁硅化，先用10%NaOH将玻璃器皿浸泡过夜,后分别用去离子水,0.1%HCl,去离子水，甲醇清洗,后用含量为3%氨丙基三乙氧基硅烷/二氯二甲基硅烷的甲醇(APS)浸泡30分钟，用后甲醇清洗，后置于80℃烤箱烘烤2h即可。
优点是只要器皿硅化层没有被破坏，器皿可以不用泡酸，只需简单清洗即可
缺点是二氯二甲基硅烷有毒，操作需一定条件
一、制金
1、热源：电炉、磁力加热搅拌器、红外线加热板
反应容器：普通锥形瓶
优点：器材简便易得、易大量生产
缺点：a、温度不精确
b、受热不均，可能导致金的颗粒大小不一
c、制金过程中，水分蒸发较多，导致反应体系中的物质浓度有所变化，在少量金的制备过程中这个缺点尤其突出，有的实验室采用在锥形瓶外接冷凝管的方式来消除这种影响
2、热源：套式恒温加热器
反应容器：圆底烧瓶
优点：器材简便易得、易大量生产、部分的套式恒温加热器有温控功能
缺点：a、未见有搅拌功能的套式恒温加热器，反应器中的溶液温度均一程度值得怀疑
b、同1－c
c、不同大小的烧瓶需不同规格的加热器
3、热源：恒温加热水槽、加热锅
反应容器：普通锥形瓶
优点：a、器材简便易得
b、可以实现精确温控且锥形瓶的受热面积最大
c、反应过程中，锥形瓶内的溶液不沸腾，将蒸发量将至最低，也可以加装冷凝管
d、可利用水槽的搅拌功能，将转子放入锥形瓶中，让反应在搅拌下进行
缺点：a、水浴槽的大小将限制锥形瓶的大小，每一次产量有限（500mL-1L），若要扩大生产则需定制特殊的水浴槽，而过大的水浴槽温控又可能受限
4、热源：加热套
反应容器：无特定要求
优点：a、可温度控制，器皿受热均匀
缺点：a、一般生物试验室可能没有
b、未见有搅拌功能加热套
以上各种制金设备所制金的颗粒大小均一度的比较没查到相关的资料，一切可能还要由粒径分析仪的结果决定。
二、胶体金－抗体复合物的纯化及浓缩
1、离心纯化浓缩
设备：高速离心机
优点：没什么特别的优点
缺点：a、离心条件较猛烈，可能会遇到挂壁的现象
b、大批量生产时，同一批胶体金在标记完毕后需分多次离心
c、离心完毕后倾倒上清液时需小心，否则沉淀的金有再混入溶液的可能
2、超滤
2.1、设备：超滤膜包、超滤柱
优点：a、条件温和
b、可以在超滤浓缩的同时继续添加待浓缩的液体，或者在浓缩的同时对金进行洗涤除去游离的抗体
c、操作相对简便
d、超滤包可以反复使用，寿命2-3年
缺点：a、一根超滤柱只能对应一种产品
2.2、设备：Amicon搅拌式超滤装置、高压气体装置
优点：a、条件温和
c、操作相对简便
缺点：a、体积有限
b、浓缩和洗涤不能同时进行
c、超滤膜为耗材
三、水源
超纯水或三蒸水，所需仪器为超纯水或三蒸水机
四、玻璃器皿的处理
1、制金、标记、保存等所用的玻璃仪器在使用前需进行泡酸处理以除去表面的杂质，即使用重铬酸钾－硫酸溶液处理
2、将器皿内壁硅化，先用10%NaOH将玻璃器皿浸泡过夜,后分别用去离子水,0.1%HCl,去离子水，甲醇清洗,后用含量为3%氨丙基三乙氧基硅烷/二氯二甲基硅烷的甲醇(APS)浸泡30分钟，用后甲醇清洗，后置于80℃烤箱烘烤2h即可。
优点是只要器皿硅化层没有被破坏，器皿可以不用泡酸，只需简单清洗即可
缺点是二氯二甲基硅烷有毒，操作需一定条件
