【公告】核酸技术版零应助贴整理2007.7.1-2007.7.30，请大家积极参与讨论，加分从优！

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已应助帖不代表求助已经解决，鼓励战友继续积极应助，加分机会与尚未应助帖均等
不规范贴不在此次整理范围，请大家规范发贴

请大家在发帖前仔细阅读版规,细心搜索文献资料及丁香园内部后再发求助帖,以减少版主和其他热心战友的工作量.谢谢!

1.【求助】T4 DNA Pol 补平
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9229803&sty=1&tpg=25&age=0
2.【求助】设计引物扩增TSLP全长基因
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9430515&sty=1&tpg=25&age=0
3.【求助】反向斑点杂交的问题
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9432142&sty=1&tpg=24&age=0
4. 【求助】寡核苷酸探针用什么稀释?
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9432164&sty=1&tpg=24&age=0
5. 【求助】关于质粒标签蛋白的真核细胞本底问题
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9424863&sty=1&tpg=24&age=0
6. 【求助】质粒酶切
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9297459&sty=1&tpg=24&age=0
7. 【求助】如何富集转染的细胞?
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9426599&sty=1&tpg=24&age=0
8. 【求助】做荧光原位杂交前探针该如何处理？
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9423380&sty=1&tpg=24&age=0
9. 【求助】大家知道液闪仪能不能测36CL啊？
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9434180&sty=1&tpg=24&age=0
10. 【求助】microRNA表达系统
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9436677&sty=1&tpg=24&age=0
11. 【求助】3xflag 核苷酸序列
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9438206&sty=1&tpg=24&age=0
12.【求助】DNA序列问题
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9438589&sty=1&tpg=24&age=0
13. 【求助】asnC::Km中的::是什么意思
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9438734&sty=1&tpg=24&age=0
14. 【求助】测序时中间的反应显示特殊结构，那我的序列怎么拼接啊？
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9438759&sty=1&tpg=24&age=0
15. 【求助】关于northern内参
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9438970&sty=1&tpg=24&age=0
16. 【求助】双酶切问题
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9087837&sty=1&tpg=24&age=0
17. 【求助】问下PEG-MgCl2的配制方法
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9439335&sty=1&tpg=23&age=0
18. 【求助】原核注射表达载体求助
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9440281&sty=1&tpg=23&age=0
19. 【求助】尿液RNA提取
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9359002&sty=1&tpg=23&age=0
20. 【求助】请教一个关于Goldview的问题
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9441505&sty=1&tpg=23&age=0
21. 请教 ncbi 中找基因序列
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9441829&sty=1&tpg=23&age=0
22. 【求助】RNA-EMSA中蛋白核酸混合物无法下孔
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9439129&sty=1&tpg=23&age=0
23. 【求助】关于内参actin的问题
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9445071&sty=1&tpg=23&age=0
24. 【求助】如何将Dnase I 随机消化后的片段回收?
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9426500&sty=1&tpg=23&age=0
25. 【求助】关于靶点的选择与目的基因的pcr引物位置的选择
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9415791&sty=1&tpg=23&age=0
26. 【求助】请问有谁知道关于 密理博的超滤管Microcon Filter Units
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9445748&sty=1&tpg=23&age=0
27. 【求助】PFGE求助
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9439427&sty=1&tpg=23&age=0
28. 【求助】请问怎么用UCSC查找一个区间内的基因数及具体情况？
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9447165&sty=1&tpg=23&age=0
29. 【求助】求助穿梭质粒pYX212的序列
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9448420&sty=1&tpg=23&age=0
30. 【求助】酶切的奇怪现象，清高首赐教
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9447967&sty=1&tpg=23&age=0
31. 【求助】PEQ40的质粒及图谱
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9449653&sty=1&tpg=22&age=0
32. 【求助】跑DNA胶看有无凋亡，上样质量一致还是体积一致
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9450923&sty=1&tpg=22&age=0
33. 【求助】欲测脑内cl-通道的开放情况，除了膜片钳以外有什么办法？
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9452522&sty=1&tpg=22&age=0
34. 【求助】郁闷的重组！
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9456404&sty=1&tpg=22&age=0
35. 【求助】求助造血干细胞的mRNA抽提
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9460593&sty=1&tpg=22&age=0
36. 【求助】求助！！！真核表达载体的选择
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9460625&sty=1&tpg=21&age=0
37. 【求助】求助-----Not1 Xba1双酶切
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9461237&sty=1&tpg=21&age=0
38. 【求助】质粒的提取
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9461940&sty=1&tpg=21&age=0
39. 【求助】关于探针标记的检测
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9462139&sty=1&tpg=21&age=0
40. 【求助】能否更换引物？急急！
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9462207&sty=1&tpg=21&age=0
41. 【求助】检测DNA血样的难题
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9462268&sty=1&tpg=21&age=0
42. 【求助】脐静脉内皮细胞原代培养
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9462324&sty=1&tpg=21&age=0
43. 【求助】有关核酸染色的问题！（急急急！！！）谢谢各位高人指点！
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9462901&sty=1&tpg=21&age=0
44. 【求助】转化后提不出质粒
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9458434&sty=1&tpg=21&age=0
45. 【求助】NaOH法提取FTA试纸上DNA
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9465022&sty=1&tpg=21&age=0
46. PCR – CTP, 等位基因特异性聚合酶链反应(AS - PCR)
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9460981&sty=1&tpg=21&age=0
47. 【原创】路过的大侠看一眼：确定剪切本序列的方法还有什么
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9467714&sty=1&tpg=21&age=0
48. 【求助】真核表达 急
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9469048&sty=1&tpg=21&age=0
49. 【求助】DNA电泳看ladder
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9469077&sty=1&tpg=21&age=0
50. 【求助】如何同时抽提原核和真核细胞的RNA DNA
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9470775&sty=1&tpg=21&age=0
51. 【求助】RT-PCR结果
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9466118&sty=1&tpg=21&age=0
52. 【求助】急,预测启动子需要的基因上游序列从哪获取?
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9471980&sty=1&tpg=20&age=0
53. 【求助】AAM培养基怎么灭菌
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9414130&sty=1&tpg=20&age=0
54. 【求助】有关DNA琼脂凝胶电泳细胞凋亡的问题
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9478102&sty=1&tpg=20&age=0
55. 【求助】双元质粒pBI121提取及酶切浓度、拷贝数？
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9469647&sty=1&tpg=20&age=0
56. 【求助】关于转座子的分析鉴定
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9477157&sty=1&tpg=20&age=0
57. 【求助】启动子后序列改变是否影响目的基因表达
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9477263&sty=1&tpg=20&age=0
58. 【求助】基因组的不完全酶切，看看，真搞不懂,帮帮我呀
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9479261&sty=1&tpg=20&age=0
59. 【求助】测序后有很大的疑问（有测序结果），哪位能帮忙解答一下，谢谢了！！（7月9日有修改）
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9478660&sty=1&tpg=20&age=0
60. 【专题讨论】如何从甲醛固定过的细胞中提取总RNA
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9482816&sty=1&tpg=20&age=0
61. 【求助】如何提取骨髓间充质干细胞的RNA
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9484475&sty=1&tpg=20&age=0
62. 【求助】自杀性质粒pJP5603的图谱
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9484561&sty=1&tpg=20&age=0
63. 【求助】请教大家有关DNase I 保护试验的问题!
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9484723&sty=1&tpg=19&age=0
64. 【求助】STR PCR产物长度的确定
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9486880&sty=1&tpg=19&age=0
65. 【求助】求助：原位杂交遇到困难
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9487437&sty=1&tpg=19&age=0
66. 【求助】腺病毒载体保存一年还能用吗?
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9488946&sty=1&tpg=19&age=0
67. 【求助】如何对大厂杆菌中dsRNA进行定量检测？
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9489570&sty=1&tpg=19&age=0
68. 【求助】做变性电泳槽应如何处理？
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9475549&sty=1&tpg=19&age=0
69. 【求助】利用cDNA与基因组DNA饱和杂交的方法构建均一化cDNA文库
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9490258&sty=1&tpg=19&age=0
70. 【求助】SOS!GFP基因是与目的基因融合表达还是分别表达好?
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9490451&sty=1&tpg=19&age=0
71. 【求助】cy3杂交的颜色
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9491354&sty=1&tpg=19&age=0
72. 【求助】抗泡沫剂
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9492266&sty=1&tpg=19&age=0
73. 【求助】质粒电泳图 好奇怪啊 怎么回事呢
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9488616&sty=1&tpg=19&age=0
74. 【求助】哪位用过pCDF1-MCS1-EF1-copGFP ？
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9495098&sty=1&tpg=18&age=0
75. 【求助】基因融合表达
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9491568&sty=1&tpg=18&age=0
76. 【求助】突变后的质粒如何保存?
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9500088&sty=1&tpg=18&age=0
77. 【求助】急求，做AAV病毒的战友
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9500731&sty=1&tpg=18&age=0
78. 【求助】求乳酸菌引物怎么设计
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9483289&sty=1&tpg=18&age=0
79. 【求助】在分泌蛋白的信号肽前加上荧光蛋白EGFP后该分泌蛋白还能分泌出来吗？
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9501227&sty=1&tpg=18&age=0
80. 【求助】同源重组成功了吗？
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9503148&sty=1&tpg=18&age=0
81. 【求助】请教RNAi有关问题.....
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9506620&sty=1&tpg=18&age=0
82. 【求助】哪位做过overlap extension PCR?
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9506906&sty=1&tpg=18&age=0
83. 【求助】如何得到未知全基因组序列的生物的某一段基因序列
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9509323&sty=1&tpg=17&age=0
84. 【求助】线粒体DNA突变的表示方式?
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9418462&sty=1&tpg=17&age=0
85. 【求助】大家帮忙看看我的tr-pcr电泳图
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9508917&sty=1&tpg=17&age=0
86. 【求助】求教 滤纸处理方法 急！！！
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9510960&sty=1&tpg=17&age=0
87. 【求助】大家都来看看我的酶切
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9510489&sty=1&tpg=17&age=0
88. 【求助】在作质粒电泳时遇到的一个怪问题,特虚心向大家请教!
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9513957&sty=1&tpg=17&age=0
89. 【求助】克拉霉素抗性筛选的剂量
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9514240&sty=1&tpg=16&age=0
90. 【求助】请教某质体的名称中 pFW5::Φ(nlmCp-luc)，Φ的意义
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9515959&sty=1&tpg=16&age=0
91. 【求助】cDNA文库保存的问题（再线等）
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9515164&sty=1&tpg=16&age=0
92. 【求助】如何设置PCR扩增梯度及体系？
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9509151&sty=1&tpg=16&age=0
93. 【求助】求助：PCR产物量少，请各位帮忙分析一下啊。
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9516880&sty=1&tpg=16&age=0
94. 【求助】检测芯片，寡核苷酸探针的设计原则
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9517920&sty=1&tpg=16&age=0
95. 【求助】RT-PCR阴性对照的图，请大虾们指点
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9518120&sty=1&tpg=16&age=0
96. 【求助】向各位大虾们请教基因克隆表达的问题
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=7997473&sty=1&tpg=16&age=0
97. 【交流】质粒转染真核细胞后，定位在细胞质还是细胞核？
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9520051&sty=1&tpg=16&age=0
98. 【求助】质粒定点诱变，烧钱又伤神
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9521138&sty=1&tpg=15&age=0
99. 【求助】人mtDNA全长序列的困惑？我该取哪个？
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9521260&sty=1&tpg=15&age=0
100.【求助】谁做过对Jurkat细胞转染反义寡核苷酸或者短片断的siRNA的转染效率
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=7467485&sty=1&tpg=15&age=0
101. 【求助】问一个弱弱的问题:体内的RNAi一定要用腺病毒或慢病毒,质粒包吗
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9528495&sty=1&tpg=14&age=0
102. 【求助】磷酸化的反应体系
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9528522&sty=1&tpg=14&age=0
103. 【求助】miRNA含量
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9530659&sty=1&tpg=14&age=0
104. 【求助】第一次做mRNA纯化，失败了
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9507752&sty=1&tpg=14&age=0
105. 【求助】SOE引物设计
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9536620&sty=1&tpg=14&age=0
106. 【求助】pGEX-4T-1上用salI和XhoI可以切开吗？
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9536291&sty=1&tpg=15&age=0
107. 【求助】有没有人做过cDNA library screening的工作啊？
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9536963&sty=1&tpg=14&age=0
108. 【求助】有关mRNA纯化的问题
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9537747&sty=1&tpg=14&age=0
109. 【求助】请问AD293与293有什么区别
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9538382&sty=1&tpg=14&age=0
110. 【求助】请教：两基因用ires连与用酶切位点连接有何不同
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9539961&sty=1&tpg=14&age=0
111. 【求助】DNA电泳，溴酚蓝跑成模糊一片，是什么原因？
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9542832&sty=1&tpg=14&age=0
112. 【求助】cDNA为模板的RNA探针合成
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9548177&sty=1&tpg=13&age=0
113. 【求助】关于DNA的琼脂糖凝胶电泳
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9548209&sty=1&tpg=13&age=0
114. 【求助】质粒转化老是不成功,求救!
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9550404&sty=1&tpg=13&age=0
115. 【求助】紫外 照射使碱基突变的效率有多高？
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9553083&sty=1&tpg=12&age=0
116. 【交流】请问点突变与启动子
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9555590&sty=1&tpg=12&age=0
117. 【求助】如何构建beta-catenin超表达载体？
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9438378&sty=1&tpg=12&age=0
118. 【求助】请教高人,谁知道高盐法提取鱼类基因组DNA的方法步骤
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9558682&sty=1&tpg=12&age=0
119. 【求助】基因组DNA文库构建过程中遇到的怪问题
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9560569&sty=1&tpg=11&age=0
120. 【求助】质粒大抽去内毒素中使用的精胺酸具体是什么啊？！急！！！
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9561387&sty=1&tpg=11&age=0
121. 【求助】提取细菌基因组DNA时的问题？
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9565729&sty=1&tpg=11&age=0
122. 【求助】EST文库
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123. 【求助】做突变中遇到的问题
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124. 【求助】菌斑的假阳性率
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125. 【求助】micro表达载体的选择
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126. 【求助】关于序列分析的问题
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127. 【求助】大麦种子RNA的提取
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128. 【求助】几个有关DNA的问题想请教一下~~
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129. 【求助】提鸡蛋卵黄膜基因组时，蛋白含量高应如何处理？
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130. 【求助】提取蟾蜍的RNA作PCR，用什么做内参阿
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131. 【求助】GFP和外源片断连接，是否会影响GFP的荧光强度？
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132. 【求助】基因组DNA酶切
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133. 【求助】带空心－核算垂直板非变性电泳
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134. 【求助】用核酸酶进行酶切DNA时，蛋白需要去除的很干净吗？
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135. 【求助】利用Lipofectamine2000法转染以PCDNA3.1/ZEO(+)为载体的质粒。
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136. 【求助】反转录酶必须要引物吗
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137. 【求助】病毒扩增的问题
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138. 【求助】求助U6启动子在胚胎发育早期的表达问题
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139. 【求助】JAK1外显子的确定
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140. 【求助】人的内参（β-actin）能够用于真菌吗？
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141. 【求助】mRNA差异显示疑问
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142. 【求助】转化真菌的质粒
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143. 【求助】请教如何在大肠杆菌里找强启动子
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144. 【交流】核酸抽提和质粒抽提的问题探讨
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145. 【求助】请问鼠的基因表达质粒能否转染人的肿瘤细胞？
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146. 【求助】微量PCR反应体系的设定
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147. 【求助】两个载体稳定转染，如何观察其是否整合至同一染色体上？
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148. 【求助】DNase 1可以消化DNA/RNA杂合链中的DNA单链吗
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149. 【求助】腺苷三磷酸的解离
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150. 【求助】质粒酶切作银染的怪异结果，请大家鉴定
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151. 【求助】初学者请教 摇菌
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152. 【交流】帮我分析一下线虫基因组抽提方法
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153. 【求助】RNA病毒real time RT PCR时做标准曲线所需标准品如何制备
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154. 【交流】CE-SELEX收集问题
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155. 【求助】关于RNA干扰序列的PCR问题
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156. 【求助】提组织DNA看凋亡ladder怎么总是不成功？
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157. 【求助】质粒放置两年后会不会变质?我现在测序总是信号无反应!
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158. 【求助】Enterokinase引物设计
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159. 【求助】在连接，转化的过程中，质粒的长度对实验影响大吗？
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160. 【求助】 求助解释引物设计原理?愿转移2分,谢谢
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