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丁香园论坛
1980
本人持有以下载体及基因:(原则上只交换不赠送,欢迎广大站友互通有无)
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一、载体
1)、miRNA载体
Promega miRNA靶标克隆载体 psiCHECK-2 psiCHECK2 amp
Ambion miRNA靶标克隆载体 pmiR-report pmiRreport amp
Invitrogen miRNA过表达载体 PCDNA TM 6.2-GW/EmGFP-miR
2)、哺乳动物/真核表达载体
pcDNA3.1+ 不含任何标签的真核表达载体 amp/neo 5.4kb E. coli/mammals
pcDNA3.1- 不含任何标签的真核表达载体 amp/neo 5.4kb E. coli/mammals
pcDNA4/V5-His A, amp 含His标签的真核表达载体 amp/neo
pcDNA 3.1(-) myc-hisA 含His标签的真核表达载体 amp/neo
pcDNA 3.1(-) myc-hisB 含His标签的真核表达载体 amp/neo
pcDNA 3.1(-) myc-hisC 含His标签的真核表达载体 amp/neo
pcDNA4/HisB 含His标签的真核表达载体 amp/neo
pcDNA3 flag 含flag标签的真核表达载体 amp/neo
pIRES 一个真核双表达载体,外源序列只要是带有起始密码子和终止密码子就可以进行表达了,载体提供了转录装置PCMV和polyA。载体本身没有阅读框,只有转录起始位点,翻译的起始就由插入序列自己完成了。MCSB的共翻译是由IRES序列行使功能的,但要注意的是,这部分的翻译水平比较低,比前面的MCSA大概低一个数量级。所以要选择好两个蛋白的各自位置。
3)、哺乳动物/真核荧光载体
pEGFP-N1 pEGFPN1 表达 绿色 荧光蛋白和目的基因的融合蛋白,目的基因位于N端 kan/neo 4.7kb E. coli/mammals
pEGFP-N3 pEGFPN3 表达 绿色 荧光蛋白和目的基因的融合蛋白,目的基因位于N端 kan/neo 4.7kb E. coli/mammals
pEGFP-C1 pEGFPC1 表达 绿色 荧光蛋白和目的基因的融合蛋白,目的基因位于C端 kan/neo 4.7kb E. coli/mammals
pEGFP-C2 pEGFPC2表达 绿色 荧光蛋白和目的shRNA的融合蛋白,目的基因位于C端 kan/neo 4.7kb E. coli/mammals
pEGFP-C3 pEGFPC2表达 绿色 荧光蛋白和目的shRNA的融合蛋白,目的基因位于C端 kan/neo 4.7kb E. coli/mammals
pSUPER-EGFP pSUPEREGFP表达 绿色 荧光蛋白和目的基因的融合蛋白,目的基因位于N端 kan/neo 4.7kb E. coli/mammals
pIRES2-EGFP pIRES2EGFP 双顺反子表达目的基因和 绿色 荧光蛋白 kan/neo 5.3kb E. coli/mammals
pIRES2-ZsGreen1 双顺反子表达目的基因和 绿色 荧光蛋白,目的基因位于C端 kan/neo 5.3kb E. coli/mammals
pIRES-hrGFP-1a
pDsred1-N1 pDsredN1 表达 红色 荧光蛋白和目的基因的融合蛋白,目的基因位于N端 kan/neo 4.7kb E. coli/mammals
pDsred1-C1
pDsred2-C1 pDsred2C1 表达 红色 荧光蛋白和目的基因的融合蛋白,目的基因位于C端 kan/neo 4.7kb E. coli/mammals
pDsRed2-1
pmCherry-C1 pmCherry-C1 表达 红色 荧光蛋白和目的基因的融合蛋白,目的基因位于C端 kan/neo 4.7kb E. coli/mammals
pECFP-C1 pECFPN1 表达 青色 荧光蛋白和目的基因的融合蛋白,目的基因位于N端 kan/neo 4.7kb E. coli/mammals
pEYFP-C1 pEYFPC1 表达 黄色 荧光蛋白和目的基因的融合蛋白,目的基因位于C端 kan/neo 4.7kb E. coli/mammals
4)、哺乳动物/真核荧光素酶载体(研究启动子专用)来自荧火虫的化学发光剂,加入底物后发光,不适合追踪单个细胞。
PGL3-basic PGL3basic amp
PGL3-control PGL3control amp
PGL3-enhancer amp
PGL3-promoter amp
pRL-TK pRLTK amp
pRL-CMV pRLCMV amp
pRL-SV40 pRLSV40 amp
pRL家族海肾荧光素酶(Rluc)对照报告基因载体系列是设计应用于双荧光素酶报告基因检测系统的。pRL载体提供组成性表达的海肾荧光素酶,可与一个萤火虫荧光素酶载体联合共转染哺乳动物细胞。海肾荧光素酶的表达为使实验的萤火虫荧光素酶报告基因正态化提供内对照值。pRL载体包含一个编码海肾荧光素酶(Rluc)的cDNA, 这个cDNA从珊瑚虫类腔肠动物海肾(Renilla reniformis)中克隆而来。目前有四个不同的启动子载体。其中HSV-胸腺嘧啶核苷激酶启动子(pRL-TK)相对较弱, 在提供海肾荧光素酶报告基因载体的组成性表达时特别有用。早期SV40 增强子/启动子区域(pRL-SV40)和CMV极早期增强子/启动子区域(pRL-CMV)一般提供高水平转录,因此也许不适于应用在实验载体带有强调节因子的辅助报告基因实验中。一般, 我们建议在将要应用的目标细胞中验证一个特定辅助报告基因的性能。
PGL4.29 amp
PGL4.26 amp
PGL4.51 amp
PGL4.75 amp
5)、原核表达载体(Novagen):
pGEX4T-1 pGEX4T1 N端带GST在细菌内表达蛋白的载体
pGEX4T-3 pGEX4T3 N端带GST在细菌内表达蛋白的载体
pGEX6P-1 pGEX6P1 N端带GST在细菌内表达蛋白的载体
pET21b
pETDuet-1
pET26b
pET42b
PET11c amp
PET15b amp
PET17b amp
PET22b amp
PET24a kana
PET28a kana
pet30a
PET32a kana
PET39b kana
PET42a kana
PET302
PET303
6)、Clontech 酵母双杂交系统:
pGBKT7-53 kana
pGBKT7-lam kana
pGADT7-T amp
pCL1 control vector amp
7):其它载体
pLNCX2 amp Clontech逆病毒载体
PVAX1载体 是目前做DNA疫苗最常用的载体之一,是美国FDA认可的应用于核酸疫苗的表达载体, 构建上没有什么特殊的要求,因为适合于DNA疫苗,所以便于短肽的表达,此载体在MCS中Xba I后已经加有终止密码子,所以可以不必在引物中加终止密码子. kozak序列可以增强基因的翻译而增强基因的表达, 没有它基因也能表达, 但是建议你在构建时在目的基因起始密码子ATG前加上这一个序列
pVL1393, 昆虫表达载体
pIEX/Bac-1 昆虫表达载体
pTET on
pTeT off
pTER-tight
pBAD HisA amp
pBAD myc HisA amp
pACYC184 amp
pBluescript II SK (+) amp
pIRESneo3
pPICZ α B
pVL1393,
pIEX/Bac-1
pcmv-myc
P2GWF7
pIS2 amp
pFlag cmv1 amp
pPICZ α B