【资源】各种原核和真核表达载体（总有一款适合你！）

<font>一，酵母表达系统</font>

<font>毕赤酵母表达系统（</font><font>invitrogen</font><font>公司）：分泌型质粒</font><font>pPIC9K</font><font>，</font>

<font>宿主菌毕赤酵母</font><font>GS115</font>
<font>分泌型质粒</font><font>pPICZalpha </font><font>（甲醇诱导）</font><font>宿主菌毕赤酵母</font><font>x33</font>
<font>分泌型质粒</font><font>pHIL-S1</font>
<font>二，原核表达质粒</font>

<font>表达宿主菌为</font><font>BL21(DE3)</font><font>系列</font>

<font>带</font><font>His</font><font>标签（</font><font>N</font><font>端）：</font><font>PET5-(a)</font><font>氨苄抗性</font>

<font>带</font><font>His</font><font>标签（</font><font>N</font><font>端）：</font><font>PET28-(a)</font><font>卡那抗性</font>

<font>带</font><font>His</font><font>标签（</font><font>C</font><font>端）：</font><font>PET24-(b)</font><font>卡那抗性</font>

<font>带</font><font>His</font><font>标签（</font><font>C</font><font>端）：</font><font>PET21-(a)</font><font>氨苄抗性</font>

<font>带</font><font>His</font><font>标签（</font><font>N</font><font>端）</font><font>+TrxA(</font><font>硫氧还蛋白</font><font>)</font><font>：</font><font>PET-32a</font><font>氨苄抗性</font>

<font>带</font><font>His</font><font>标签（</font><font>N</font><font>端）</font><font>+DsbA(</font><font>二硫键形成蛋白</font><font>A)</font><font>：氨苄抗性</font>

<font>带</font><font>Gst</font><font>标签（</font><font>N</font><font>端）：</font><font>pGEX-KG</font><font>，</font><font>pGEX4T-1</font><font>，</font><font>pGEX-5x-1</font>

<font>共表达载体：</font><font>pET-duet</font><font>。</font><font>(</font><font>含有两个</font><font>T7</font><font>启动子</font><font>)</font>

<font>表达宿主菌为</font><font>M15</font><font>系列</font>

<font>表达载体：</font><font>pQE31</font>

<font>表达宿主菌为</font><font>DH5a,JM109</font><font>系列</font>

<font>热启动表达载体：</font><font>pBV220</font>

<font>克隆载体</font>

<font>pGEM-7Z,pUC19</font>

<font> </font>

<font>三，自研发原核表达载体</font>

<font>1，</font><font>带</font><font>His</font><font>标签（</font><font>N</font><font>端）：</font><font>PET-DsbA</font><font>卡那抗性</font>

<font>2，</font><font>带</font><font>His</font><font>标签（</font><font>N</font><font>端）：</font><font>PET-DsbA</font><font>（</font><font>mutation</font><font>）</font><font>卡那抗性</font>

<font>说明：</font><font>DsbA(</font><font>二硫键形成蛋白</font><font>A)</font><font>是原核蛋白中氧化性最高的一类蛋白，具有分子伴侣的性质，能辅助底物蛋白尤其是基于一类含有多个二硫键的底物蛋白形成正确的折叠。以</font><font>DsbA</font><font>作为融合分子与目的蛋白进行融合表达时大都以可溶的形式存在，保证目的蛋白的正常生理功能和空间稳定折叠状态。</font>

<font>3，</font><font>共表达载体：</font><font>pET-duet-DsbA+DsbC</font><font>。</font><font>(</font><font>含有两个</font><font>T7</font><font>启动子</font><font>)</font>

<font>说明：此载体借用</font><font>DsbA+DsbC</font><font>蛋白的分子伴侣的性质，与所需的目的蛋白尤其是一类富含二硫键的目的蛋白进行共表达，辅助目的蛋白形成正确的空间折叠状态，共表达的优点是对表达的蛋白不需要切割带来的二次纯化。</font>

<font>4</font><font>，改良版</font><font>PET-32a</font><font>：带</font><font>His</font><font>标签（</font><font>N</font><font>端）</font><font>+TrxA(</font><font>硫氧还蛋白</font><font>)</font>

<font>说明：此载体表达的融合蛋白的</font><font>N</font><font>端带有</font><font>His</font><font>标签，可以通过一步亲和层析得到纯化，</font><font>TrxA(</font><font>硫氧还蛋白</font><font>)</font><font>与目的蛋白之间含有</font><font>thrombin(</font><font>凝血酶位点</font><font>)</font><font>和</font><font>Linker</font><font>（</font><font>102bp</font><font>）序列。</font>

<font>5</font><font>，改良版</font><font>PET-NusA</font><font>：带</font><font>His</font><font>标签（</font><font>N</font><font>端）</font><font>+NusA(</font><font>角质蛋白</font><font>A)</font>

<font>说明：此载体表达的融合蛋白的</font><font>N</font><font>端带有</font><font>His</font><font>标签，可以通过一步亲和层析得到纯化，</font><font>NusA(</font><font>角质蛋白</font><font>)</font><font>与目的蛋白之间含有</font><font>thrombin(</font><font>凝血酶位点</font><font>)</font><font>和</font><font>Linker</font><font>（</font><font>102bp</font><font>）序列。</font><font>NusA</font><font>可以让超过</font><font>95%</font><font>的外源蛋白获得可溶性的原核表达，但</font><font>NusA</font><font>不具有氧化性，分子伴侣的功能比较低。</font>

<font> </font>

<font>四，真核表达质粒</font>

<font> </font><font>PVAX1</font><font>，</font><font>pEGFP-N2</font><font>，</font><font>pGL-3control</font><font>，</font><font>pMir-report</font>
<font>pCMV-Myc</font><font>在哺乳动物细胞中表达</font><font>C</font><font>端和</font><font>Myc tag(Myc</font><font>标签</font><font>)</font><font>融合的目的蛋白的表达质粒。</font>