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【求助】miRNA Sponge的使用方法

丁香园论坛

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最近比较关注miRNA Sponge(海绵体),不知哪位高手做过啊,能否介绍一下使用方法,比如是否需要转染试剂或载体,那种较好,海绵体的用量多少等等,在CNKI理搜了一下,没发现这方面的文献,国内是不是用的少啊。
其实我自己也做了不少这方面的工作,但是后来发现还是买比较省时省事。因为最重要的是我们耗不起这个时间。到现在我已经摸索了1年多了,还是没有找到一个合适的能够有效地载体。
这个东东怎么用 啊 还需要载体么?
我也在做,想构建一个好用的可以以低成本克隆重复 序列 的载体
能否介绍下具体怎么做,谢谢了!
miRNA海绵(miRNA sponge)是2007年由麻省理工大学的Phillip Sharp及他的同事利用开发出一种长期抑制miRNA基因的高效方法。miRNA海绵是一条mRNA,其3’ 非翻译区(UTR)包含若干个miRNA靶定位点。主要是利用这些靶定位点在RISC切割位点有一些错配。这样,抑制剂mRNA就不会被降解,而与RISC稳定结合,让它远离天然的mRNA靶点。因miRNA海绵本质是mRNA,故需由表达质粒编码的。
miRNA sponge

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