【求助】复制基因如何研究
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我现在关注的那个基因在一个模式生物中,只有一个拷贝。我想研究在另一个模式生物中的同源基因,检索数据库发现,在这个我想研究的模式生物中,此基因有两个同源基因,同源性在98%,而且此基因是高GC含量的基因,GC含量在某些区段在70%以上。我想通过RACE方法,得到全长cDNA,然后做克隆,及表达分析,但我目前遇到的问题是,如此高同源性的基因,我用RACE的方法,是否能将两个基因分别克隆出来,有没有更好的方法,使得我可以得到这两个基因的cDNA? 请各位大侠,高人们帮我看看,先谢谢各位了!!!谢谢:):):)
没做过RACE实验,但我想可以的。
关注中。。。。。。
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出现两种拷贝的原因很可能是由于整个基因组复制的缘故。从基因的非冗繁原则上来讲,这两个拷贝在表达,功能和调控应该是有所不同的。所以这两个拷贝的同源性虽然很高,但是它们的5'-UTR之间的同源性应该就没有这么高了。你可以查一查它们的UTR序列,根据特异的UTR序列从cDNA中分别克隆出两个拷贝,然后再用巢式PCR把这两个基因分别克隆出来。
是什么物种 没有序列可以参考吗 如果有的话 直接PCR调取即可 。
RACE不太简单 麻烦
RACE不太简单 麻烦
谢谢!!!
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