【求助】PBMC里的几个基因mRNA转录与蛋白表达不一致
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(重复发贴,请版主见谅!)
各位老师你们好!我是一名刚踏入研三的小硕,做了一年的基础实验,现在实验结果都出来了;但在分析时发现,所做的三个细胞因子中,有两个细胞因子的转录水平与其蛋白表达水平不一致;也就是说某组病人的细胞因子转录水平明显低于其他各组,且该转录水平与临床资料相关;但其蛋白表达水平却是高于其他组别,而与临床资料无相关性;对于这样的情况,我该如何解释实验结果?望请各位老师给予指点,学生感激不尽,谢谢!(转录水平检测使用的是Realtime-PCR,蛋白水平用的是Flow cytometry)
各位老师你们好!我是一名刚踏入研三的小硕,做了一年的基础实验,现在实验结果都出来了;但在分析时发现,所做的三个细胞因子中,有两个细胞因子的转录水平与其蛋白表达水平不一致;也就是说某组病人的细胞因子转录水平明显低于其他各组,且该转录水平与临床资料相关;但其蛋白表达水平却是高于其他组别,而与临床资料无相关性;对于这样的情况,我该如何解释实验结果?望请各位老师给予指点,学生感激不尽,谢谢!(转录水平检测使用的是Realtime-PCR,蛋白水平用的是Flow cytometry)
是否还存在某些调控因子调控这两个细胞因子的表达,比如miRNAs,虽然这两个细胞因子的转录水平在某病人组是明显低于其他组,但由于该病人组中调控这两个细胞因子的miRNAs转录水平也低甚至未表达(如因基因组区段缺失等等原因)而在其它组该miRNAs表达正常,这样的话,这两个细胞因子的蛋白表达水平就相对高。
谢谢,但是这也只能是猜测吧?论文讨论和结论部分如何写?
你的实验结果重复了没?如果可信度高,就实话实说。各种因子均以其蛋白形式发挥作用,蛋白水平与临床资料无相关性,说明此因子与你的疾病关系不大;阴性结果也是一种结果,没有必要强求阳性结果。你再查些文献报道,在讨论部分加强你的论点就可以。
wulingjie2008 wrote:
谢谢,但是这也只能是猜测吧?论文讨论和结论部分如何写?
可以计算与实验验证的。
我的mRNA实验结果每个都做了三个复孔,蛋白就做了一次!这个算不算重复?
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