【求助】MAPK特异性抑制剂使用方法
丁香园论坛
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哪位高手能指点一下MAPK特异性抑制剂的使用方法？我培养的是海马神经元。:)谢谢谢谢
MAPK信号通路通常有3个主要的成员（ERK1/2, JNK1/2和p38），相应的抑制剂为U0126（还有一种PD98059，溶解性较差），SP600125和SB203580三种。使用的方法是先用DMSO先溶解成母液，然后在用无血清的细胞培养液稀释成工作液浓度。由于胎牛血清中还有较多的细胞因子，而细胞因子对细胞的MAPK信号通路有影响（而且影响较大），所以通常用不含有血清的细胞培养液来稀释MAPK特异性抑制剂（这时就用DMSO作为试剂的对照，排除试剂DMSO的影响）。通常的做法是将培养的细胞用无血清培养液稀释的抑制剂（U0126, SP600125, SB203580)共同孵育一定的时间段（自己设计），然后再加入某个因子（通常是刺激因子，给细胞以胁迫压力等）。最后用western-blotting技术检测活化的（或者磷酸化的）ERK1/2, JNK1/2,P38的表达水平。
同时附上一篇文献支持（其实文献不只一篇）
本人正在研究MAPK信号通路在食管癌中的病理生理学意思，正在使用以上3种MAPK信号通路常用的抑制剂啊。愿与同行交流，一起进步啊！
本人的联系方式 QQ： 994465791 邮箱：shutaozheng824@yahoo.com.cn
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学习了 谢谢！
不要忘了给我加分啊！谢谢
Sebolt-Leopold JS, 这个人是Raf-Ras-MEK信号通路抑制剂的大牛，在PubMed上查一查，关于MAPK抑制剂体内体外的用法的论著还是综述都是他写的
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