材料与仪器
步骤
状态指示灯。具
体操作如下:
i. 平台温度控制器:改变平台的温度,并且可以显示平台的摄氏温度或华氏温度 。、平台温度预设为 3 7 ℃ ,按 下 「set」按钮可以看到平台的实时温度,持续按 住 「set」按钮的同时按上下按钮可以改变平台温度,注意:如果改变的幅度过大,平台可能最多需要 45 min 的加热时间。
ii停止按钮:可以立刻停止成像暗箱内部所有 4 个马达的运转。
注意:只有当发生严重故障时停止按钮才可以被按下,如当平台上升过程中,承载的样品过高可能会损坏成像暗箱时。按下停止按钮后,如需重新启动系统,请按照程序启动系统并进行初始化。切 断 I V I S 系统的电源,等 待 5s ,重新接通电源,点击镜头控制面板上的初始化按钮,完成初始化程序后就可以进行成像操作了。
iii光照强度控制旋钮:使用此旋钮可以改变成像暗箱内部 L E D 的光照强度,这 个 L E D 是用来照亮样品用的。 l e d 的 开 关 是 成 像 软 件 的 镜 头 控 面 板 「Light O n 」按钮。通过旋转按钮调整需要的光照强度,旋钮分十阶并有铃声提示,当达到所需的光照级别后,取消勾选镜头控制面板的「Light 〇 n」可以关掉 L E D 。
iv状态指示灯:指示是否可以打开成像暗箱门,只有当绿灯亮时才可以打开。一定不要在红灯亮时打开暗箱门。
(7) 气体麻醉:IVIS 系统包含一个麻醉气体控制装置,在成像暗箱的后面有 2 个 0.25英寸的进气口和出气口,暗箱的右边是控制开关,暗箱内也有 2 个 0.25 英寸的出气口和进气口分别位于样品台的左后和右后方。
注意:请仔细确认暗箱内的管道或其他固定装置不会发出荧光,使用者在进行成像操作前请测试这些管道和装置。
(8) 暗箱门的操作: IVIS 成像暗箱只需使用很轻的力即可牢固锁住箱门。请定期检查箱门的锁紧系统是否工作正常。连 接 IVIS 成像系统成像暗箱平台的挡帘可以遮盖住平台下部的空间,这个挡帘提醒使用者不要在平台下放任何物品。
(9) 成像前基本准备:
a.黑色垫纸:尽管平台是经过黑色电镀处理的,但还是建议使用者在成像时在平台上垫一张高品质的黑色垫纸,特别当测试的是生物样本时。高品质黑色垫纸可以有效的阻止光反射,并且可以保持平台清洁。
b.将成像物品置中:将样品放置在成像平台正中,关上暗箱门,勾选镜头控制面板 上 的 「Live」按钮,监视器上将显示样品的图像。如果样品已经置中,取消勾选 「Live」按钮后就可以进行成像操作了,如果偏禽中心,点 击 「Live」按钮后,打开箱门,调整样品的位置,重复上述步骤直到在监视器上看到样品图像。
c.发光材料:使用者请牢记「任何物体都会发突光」,大部分塑料,几乎所有的磁带、植物、染料、吃的食物 (大部分是植物)、鼠尿、动物窝里的草垫都已经被证实可以发荧光,采用荧光成像时应尽量避免这些物质的污染。使用者操作IVIS 成像系统时应戴上手套。
(10) 系统关闭程序:不 建 议 在 1 天内多次开关系统,每天凌晨,通常是早上 4〜 6 点 ,IVIS 系统会自动进行背景测量和系统自检。如果必须关闭系统 , 一 定要严格按照以下步骤进行。 -
a.保存实验结果,关闭活体成像软件。
b.关闭 IVIS 成像暗箱。
c.关 闭 Windows 操作系统。
来源:丁香实验