【求助】加通路的抑制剂前需要检测这个抑制剂对细胞活性的影响吗？
丁香园论坛
3337
加通路的抑制剂前需要检测这个抑制剂对细胞活性的影响吗？从道理上来说应该检测吧！但是很多文献都没有检测,特别是很多抑制剂都是用DMSO溶解的，如何解释，请高手指点，多谢！！
一般用DMSO做一个空白对照就可以了，说明DMSO对细胞生长，信号的传导都不影响。如果用通路抑制剂，理论上确实需要检测该抑制剂对其他通路的影响和对细胞生长的影响。一个必须考虑的问题是，通路抑制剂一般特异性都比较低，一般的通路抑制剂都会对其他的信号通路有影响，所以必须考虑通路抑制剂的特异性问题。通常是通过降低所加的抑制剂浓度来减少副作用。但是实际上因为细胞信号通路错综复杂，所以很难也没有时间和精力去全面的检测。如果能用大家公认的通路抑制剂和通用的浓度最好。如果是自己新开发的通路抑制剂就需要考虑这方面的问题
nulidaodi wrote:
加通路的抑制剂前需要检测这个抑制剂对细胞活性的影响吗？从道理上来说应该检测吧！但是很多文献都没有检测,特别是很多抑制剂都是用DMSO溶解的，如何解释，请高手指点，多谢！！
抑制剂的毒性或适用浓度一般刚买来后应该是先摸一下细胞毒性,或者參考其他论文中的浓度.一般是应该摸一下浓度条件的.但是这个结果没有必要放上去,所以写论文时也不会写上去,但不代表没有测过.
DMSO溶解是因为,有些抑制剂不是亲水性的,水中溶解度低.
在加入抑制剂后，不但要检测了一下细胞的成活率，还要进行western blot，这样才能来说明信号通路的特异性，否则reviever不会认同的
在加入抑制剂后，不但要检测了一下细胞的成活率，还要进行western blot，这样才能来说明信号通路的特异性，否则reviever不会认同的
请问加抑制剂后如何检测通路的特异性？要选什么样的分子来检测？
请问加抑制剂后如何检测通路的特异性？要选什么样的分子来检测？
chuckdouble wrote:
抑制剂的毒性或适用浓度一般刚买来后应该是先摸一下细胞毒性,或者參考其他论文中的浓度.一般是应该摸一下浓度条件的.但是这个结果没有必要放上去,所以写论文时也不会写上去,但不代表没有测过.
DMSO溶解是因为,有些抑制剂不是亲水性的,水中溶解度低.
你好，我想问下您说的先摸一下抑制剂对细胞的毒性应该具体用什么方法吗？因为我现在也要做这个，在分组这方面找不到别人作用我做的这种细胞的药物浓度，作用于别的细胞的倒是有看到。我想用别的人的分组浓度做，但是我觉得没有根据啊？因为大家的细胞不一样啊 ！急切您的回复！谢谢！
本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴
师兄微信号：shixiongcoming
