【求助】请教各位老师，如何检测一个细菌中的已知序列后的一个功能基因

请教各位老师，如果检测一个细菌中的已知序列后的一个功能基因

说具体点，我用PCR扩得了一个IS的启动子，但想知道这个启动子的下游接的什么基因，请问如何实现？谢谢了！

菌落杂交
1 作 DNA cosmid 文库。
2 PCR 扩增 IS 启动子，放射性同位素或者非放射性（地高新）标记做探针。
3 plate hybridization. 找出阳性克隆，然后粘粒测序。

或者
1 PCR 扩增 IS 启动子，放射性同位素或者非放射性（地高新）标记做探针用。
2 酶切细菌基因组DNA，电泳，杂交，找出该酶切后，含 IS 序列的核酸所在的位置。假如 5 kb左右。
3 重新酶切细菌基因组DNA，电泳，胶回收 5kb 左右的所有 DNA 。
4 所有的回收片断进行自连。
5 Reverse PCR
6 克隆进载体，扩增，测序。

至于后面接续的基因的功能，那应该有更多的方法了。

谢谢LS的老师，我对杂交这系列的实验不怎么了解，请问有类似的PPT或文章推荐给我学习下吗？

再问，有类似你说的从步骤1到步骤6的文章吗？谢谢了！

杂交的具体操作步骤可以参考产品说明书。

具体的文章，还是你自己查吧，NCBI 上应该可以查到很多。