血浆凝血酶原时间测定操作规程（检验SOP）
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<font>一、项目名称：<br /> 血浆凝血酶原时间测定（prothrombin time ，PT）</font>
<font>二、检验方法名称：<br /> 凝结法</font>
<font>三、方法学原理：<br /> 在确定量的血浆样本经过一定时间的加温后，加入试剂。加入试剂后，采用波长为660nm的光照射样本。凝血过程（纤维蛋白原转化为纤维蛋白）中血的浑浊度可以通过测量散射光光强度的改变来测定。从散射光光强度的测定，可以做出凝血曲线，通过Percentage Detection Method法求得凝血时间。</font>
<font>四、方法学溯源：<br /> 凝血酶原时间（PT）测定是Quick于1935年创立的。在受检血浆中加入过量的组织凝血活酶（人脑、兔脑、胎盘及肺组织等制品的浸出液）和钙离子，使凝血酶原变为凝血酶，后者使纤维蛋白原转变为纤维蛋白。观察血浆凝固所需要的时间即凝血酶原时间。其凝固时间取决于凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅴ、Ⅹ、Ⅰ的水平。该试验是反映外源凝血系统最常用的筛选试验。</font>
<font>五、仪器：<br /> （一）型号：Sysmex CA—1500自动血液凝血分析仪<br /> （二）分析和计算参数：<br /> 1．处理量：约120个测试/小时<br /> 2．所需样本量：50μl<br /> 3．检验时间：在最长检验时间之内测出结果，典型最长检验时间：100秒<br /> 4．重复性：CV≤2%<br /> 5．计算参数：凝血酶原活动度（PT%）<br /> 凝血酶原比值（PT R）<br /> 国际标准化比值（INR）</font>
<font>六、试剂及配套品：<br /> （一）试剂：<br /> 1. 凝血活酶含钙试剂（Thromborel® S）<br /> （1）商标：德灵（DADE BEHRING）<br /> （2）包装规格：Pack for 10×4ml<br /> （3）代码：No.OUHP 29 , or<br /> （4）参数：ISI（国际敏感度指数）=0.97<br /> （5）成分：<br /> 1）Thromborel® S Reagent :<br /> a. 冻干人胎盘促凝血酶原激酶（lyophilized human placental thromboplastin）<br /> b. 氯化钙 (calcium chloride)<br /> c. 稳定剂 (stabilizers)<br /> 2) 防腐剂（Preservatives）:<br /> a.庆大霉素（Gentamicin）(0.1g/L)<br /> b. 5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮和2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮（5-chloro-2-methyl-4-isothiazol-3-one and 2-methyl-4-isothiazol-3-one）（最大量 20mg/L）<br /> 2．佛罗那巴比妥缓冲液（Dade® Owren'S Veronal Buffer）<br /> （1）商标：德灵（DADE BEHRING）<br /> （2）包装规格：Pack for 10×10ml<br /> （3）代码：B4234-25<br /> （4）成分：<br /> 1）2.84×10²M的巴比妥钠 (sodium barbital)<br /> 2）1.25×10¹M的氯化钠 (sodium chloride)<br /> 3) PH 7.35±0.1<br /> 3. 清洗液（Cleaning）<br /> 2%次氯酸钠溶液（自配）<br /> （二）配套品：<br /> 1.标准血浆（Standard Human Plasma）<br /> (1) 商标：德灵（DADE BEHRING）<br /> (2) 代码：No. ORKL<br /> 2.校准质控血浆（Ci-Trol®）<br /> (1) 商标：德灵（DADE BEHRING）<br /> (2) 代码：Level 1, B4244-10<br /> Level 2, B4244-20<br /> Level 3, B4244-30<br /> 3.质控血浆（Control Plasma）<br /> (1) 商标：太平洋（Pacific Hemostasis）<br /> (2) 代码及规格：Level 1 (Normal), 100595 10×1ml<br /> Level 2 (Abnormal), 100596 10×1ml<br /> Level 3 (Abnormal), 100597 10×1ml</font>
