【求助】新手求助，关于基因沉默的，谢谢拉

我做水稻基因后期功能验证的时候，需要构建基因沉默载体，然后转基因至正常植株中，看有没有目标表型

现在我照着用得比较多的，自己重组改造了pNW55得到artificial miRNA，然后装到过表达的载体中，然后转基因。

不过因为实验室还没有这方面的成功先例，怕不保险，所以也想做一下siRNA，网上有很多在线设计，通过Blast验证以后，基本确定了几个RNAi的目标。

想问一下这方面的专家
1. artificial miRNA和siRNA有什么异同啊？自己概念很模糊。哪个的沉默抑制效果比较有保障些呢？

2. siRNA是不是只能让公司合成？可以自己用PCR组装么？怎么操作？网上找了半天没找到

3. 如果让公司合成的话，哪个公司好些？

谢谢大家了

我想做动物的，也在关注中。

1. artificial miRNA和siRNA有什么异同啊？自己概念很模糊。哪个的沉默抑制效果比较有保障些呢？

植物中4 条RNA 沉默途径分别由微小RNA(miRNAs)和3 种小干扰RNA (siRNAs)介导，包括反式作用siRNAs (ta-siRNAs)、天然反义siRNAs (natsiRNAs)和异染色质siRNAs (hc-siRNAs)。
siRNA 途径是由dsRNA 引发的，而miRNA 途径由内源性hpRNA诱导.
个人意见，siRNA 转录后基因沉默的作用更强一些，而且有很多参考文献。

2. siRNA是不是只能让公司合成？可以自己用PCR组装么？怎么操作？网上找了半天没找到

公司合成当然可以，用PCR构建iphRNA载体也行，GATEWAY或融合pcr都行，方法有很多，CNKI上搜iphRNA。

3. 如果让公司合成的话，哪个公司好些？
这个不好说，自已决定吧。

动物方面选择余地就更大了。