【求助】求助caspase的检测方法
丁香园论坛
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本人要研究巨核细胞的凋亡情况，检测caspase-3,8,9,初步判断其通过哪条凋亡通路起作用，有很多不懂之处，需要高人指点一下：
1 如何检测caspase的活化
2 若要检测caspase的量，应选择何种可靠简便的方法
3 有专门的试剂盒可以用来检测caspase吗？
非常感谢！！
1 如何检测caspase的活化
2 若要检测caspase的量，应选择何种可靠简便的方法
3 有专门的试剂盒可以用来检测caspase吗？
非常感谢！！
1. caspase活化会产生裂解条带，western blot可以检测。
2. western blot可以半定量
3. caspase的活性有试剂盒可以检测
2. western blot可以半定量
3. caspase的活性有试剂盒可以检测
谢谢了，是不是一般caspase的检测都是用western blot? western步骤多，比较繁琐，是否有可能检测不到结果？
caspase蛋白酶的活性检测方法，个人做过和了解的有这样几种：
1. 荧光光度计/分光光度计法，比较简单，只要有荧光或普通酶标仪即可，操作过程类似与ELISA。试剂盒比较便宜，KeyGene公司有。
2. 流式细胞法，只要有流式细胞仪，买来试剂盒按照说明操作即可，优点是可以同时检测多种caspase的活性。价格较贵。
3. WB的方法，比较繁琐，通过半定量比较活化caspase蛋白（即裂解的小片段）的量判断活性强弱。
选择哪种方法根据实验要求和条件，1或2同3的联合使用，应该最能说明问题。附件是流式法的一个说明书，个人见解仅供参考。
1. 荧光光度计/分光光度计法，比较简单，只要有荧光或普通酶标仪即可，操作过程类似与ELISA。试剂盒比较便宜，KeyGene公司有。
2. 流式细胞法，只要有流式细胞仪，买来试剂盒按照说明操作即可，优点是可以同时检测多种caspase的活性。价格较贵。
3. WB的方法，比较繁琐，通过半定量比较活化caspase蛋白（即裂解的小片段）的量判断活性强弱。
选择哪种方法根据实验要求和条件，1或2同3的联合使用，应该最能说明问题。附件是流式法的一个说明书，个人见解仅供参考。
那是否可以通过流式细胞仪来直接检测caspase的量呢？谢谢
可以到偶的LAB做,
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