流式细胞术应用 | 轻松检测植物倍体
贝克曼库尔特
5457
实验简介
植物的基因组大小及 DNA 倍性和植物的品系、性状及营养和药用价值有密切联系。检测植物的基因组大小和 DNA 倍性在植物的鉴定、杂交育种等领域有重要意义。流式细胞仪可在半小时内完成从样本制备染色、植物基因组大小和 DNA 倍性测定全过程，以其方便快捷得到广泛应用。CytoFLEX 流式细胞仪具有优异的荧光分辨能力，可轻易区分不同大小的基因组，多达 10 的 7 次方线性检测范围，可更好地检测自然界或育种过程中广泛存在的多倍体现象。
材料与方法
▶ 试剂
▶ 样品制备
| Sample Type | |
| Species | 多年生植物东南景天的嫩叶 |
| Age of specimen | 新鲜 |
| Prep Method | 1. 配置溶液 ● 溶液 I ：0.1 mol/L 柠檬酸 4.2 g, 0.5% 吐温 20，定容至 200 mL, 4℃ 下保存备用 ● 溶液 I I ：0.4 mol/L 磷酸氢二钠 28.65 g，PI 20 mg, 定容至 200 mL, 室温下保存备用 2. 取 20 mg 洗净去除中脉的新叶置于塑料培养皿中 , 移取 , 用双面刀片将叶片切碎； 3. 用 1 mL 移液枪吸取切好的样品经 350 目尼龙筛网过滤到 1.5 mL Eppendorf 管中； 4. 对所得滤液在 13000 r/min 的条件下离心 30 s； 5. 用 1 mL 移液枪移去上清至 0.1 mL 处 , 加入新鲜的Ⅰ溶液 200 μL 悬浮沉淀；在准备用流式细胞仪检测样品时 , 再向样品中加入 600 μL 溶液 I I |
数据分析
通过 PI-A/PI-H 双参数散点图排除黏连细胞，根据 2 倍体的位置判断其他倍体的位置。
实验结果
