实验74 家兔减压神经传入冲动的引导

实验74 家兔减压神经传入冲动的引导

　　【目的要求】

　　1．学习在体记录神经冲动的方法。

　　2．观察家兔减压神经传入冲动的发放，从而加深对减压反射的理解。

　　【基本原理】

　　减压神经又称主动脉神经，是主动脉区感受主动脉压力的传入神经。减压神经传入冲动的频率在一定范围内随主动脉血压的升高或降低而相应增加或减少，从而使减压反射效应增强或减弱以保持血压相对稳定。由于家兔减压神经与迷走神经和颈交感神经分离开来，自成一束，为单独研究减压神经（减压反射）提供了方便。

　　【动物与器材】

　　家兔（2kg以上）、常用手术器械、止血钳、兔体手术台、前置放大器、电子刺激器、示波器及示波照相机、心电图机、保护电极、水银检压计、动脉套管、动脉夹、气管插管、屏蔽箱、注射器、20%氨基甲酸乙酯、肝素（300单位/ml）、3.8%柠檬酸钠、生理盐水、石蜡油、去甲肾上腺素（1：100000）、乙酰胆碱（1：100000）。

　　【方法与步骤】

　　1．按实验24的手术过程麻醉、固定动物，并施行气管插管术。然后一侧做颈总动脉插管，连接水银检压计（注意：此时动脉夹暂不打开）。另一侧从血管神经束中分离减压神经。

　　分离方法：首先用线提起颈总动脉，从被牵拉开来的结缔组织膜中辨认迷走神经、交感神经和减压神经。然后用玻璃解剖针自减压神经和交感神经之间的细小间隙中顺减压神经的走行自头端向胸侧轻轻划动剥离。注意：在此过程中应极力避免上述连接血管和诸神经的结缔组织膜破损。将减压神经分离1cm左右，提起神经，插入引导电极（用保护电极代替），使电极与神经接触良好。然后用止血钳把伸经周围的皮肤提起，做成人工皮兜，向兜内滴加38—40℃的石蜡油。注意：减压神经和电极记录部分均应浸泡在石蜡油中，神经与电极接触良好，但不能牵拉神经。电极记录部分也不可与周围组织接触。如必要时，可将减压神经结扎剪断，在其外周端记录传入冲动的发放。当引导电极固定良好后，实验应立即开始。注意：实验过程中要不断滴加温热的石蜡油以保护神经。

　　2．仪器的连接与参数的调整（图10－15）

　　（1）将心电图机的肢体导联线连于刺入四肢皮下的针形电极上，心电图机的输出端与示波器下线输入端相连，输入方式选用“AC”双端输入，下线灵敏度一般为1mV/cm。（2）将记录减压神经传入冲动的引导电极与前置放大器的输入端连接。放大器的放大倍数为1000，时间常数为0.001s，高频滤波为10—100kHz。

　　（3）将放大器的输出端连接示波器上线输入端，输入方式选用“AC”双端输入，上线灵敏度为100mV/cm。扫描速度：做观察用时，可选择相应的扫描速度，如加快扫描速度，可对一次减压神经传入冲动发放群进行观察；做连续照相时，X轴停止扫描，光点亮度适中，固定在荧光屏某一点（不要总用中心点，以免损伤荧光屏）；做单片拍照时，以荧光屏的X轴全长一次扫描中可出现3—4次减压神经传入冲动发放群（或3—4个心电图）为标准选择相应的扫描速度，如0.1s/cm。

　　（4）示波器照相机做连续照相，以2cm长胶片可记录到3—4个减压神经传入冲动发放群为宜。使用普通相机时，以B门做手控单片照相，示波器扫描由电子刺激器手控触发，扫描速度的选择如前所述。

　　（5）调整仪器、照相装置后，在耳缘静脉或动脉插管的侧管（注意打开水银检压计一端的夹子）注入2—3ml（300单位/ml）肝素溶液，然后慢慢开启动脉夹（开启前再一次检查或调节水银检压计的水银柱高度）。

　　3．正常血压情况下，减压神经传入冲动发放的观察减压神经传入冲动的发放是一群群的，其放发与心电同步，且落后于心电（图10－16）。加快扫描速度，观察一个冲动群的持续时间、组成冲动群的最大和最小振幅。

　　4．血压下降时，减压神经传入冲动发放的变化自耳缘静脉注入乙酰胆碱0.5ml左右，观察动脉血压在下降过程中，心电和减压神经传入冲动发放的变化；观察血压恢复时，心电和减压神经传入冲动发放的变化（图10－16）。

　　5．血压升高时，减压神经传入冲动发放的变化待血压恢复到正常并稳定后，自耳缘静脉缓缓地注入去甲肾上腺素0.5ml左右，或肾上腺素0.2ml左右。记录血压升高时相中，心电和减压神经冲动发放的变化（10-16）。

　　【注意事项】

　　本实验与离体神经干上记录动作电位不同，由于引导电极置于动物体内，除可记录到神经干发放的冲动外，尚可记录到动物的心电，肌电以及环境中存在的交流干扰，如何排除和防止这些干扰是实验能否得到完美结果的关键。

　　1.50Hz等交流干扰的排除动物置于屏蔽笼内，引线均要求是屏蔽线。使用的仪器和动物要接地，且接地点要单一，以消除大地环路的影响。引导电极要与神经妥善接触，避免接触不良（单极或双极）现象发生，同时要保持引导电极始终浸泡在液体石蜡中。

　　2．心电干扰的排除心电的干扰易于发生，也易于识别，其波形固定，具一定的周期。为消除心电干扰，引导电极要尽量远地离开心脏，并需要与周围组织绝缘。另外，引导电极的两极间距离不要过长。一般为2mm，力图使心电的传入对于此两电极是同相信号。利用放大器的辨差作用，抑制心电干扰。

　　3．肌电干扰的排除若肌电干扰由呼吸肌收缩引起，则干扰与呼吸同步，且动物往往呼吸困难，此时应检查气管插管是否通畅。

　　局部肌肉的干扰，如颈部的某些肌肉的收缩干扰，在引导电极充分与之绝缘的同时，可将动物头部摆好，不要发生过分的扭转和牵拉，并可考虑从静脉补加适量麻醉剂。

　　4．减压神经的保护和引导神经干的机能下降，如神经干燥也会产生干扰，尤其是交流干扰加剧，所以要用温热液体石蜡油保护。神经周围有血渗出，血膜的存在不利于引导电极与神经干的接触，要及时用干棉球轻轻拭去。反之，引导电极短路则记录不到冲动，此时一切干扰也消失，示波器扫描基线变得细且直（只呈现放大器的噪声了）。所以要在神经放入之前，用干棉球将电极擦干，并同时吸尽已分离开的那一段减压神经上的液体，待神经置入引导电极后，立即加入温热的液体石蜡油。注意：神经与引导电极之间不可有相对摩擦移位，否则神经因受到机械刺激产生干扰性的冲动发放。