实验50 离体小肠平滑肌电活动的描记
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实验50 离体小肠平滑肌电活动的描记
【目的要求】
1.学习离体小肠平滑肌电活动的描记方法。
2.观察离体小肠平滑肌电活动的波形及其与收缩运动的关系。
【基本原理】
小肠离体后置于适宜的理化环境中,仍可引导出慢波和快波两种电活动。慢波是平滑肌本身所具有的自发的缓慢的电变化,是一种肌源性的电活动,并不因神经传导的阻断而消失。慢波虽不能直接引起肌肉收缩,但可提高平滑肌的兴奋性,可使膜电位向暴发锋电位的水平移动,而锋电位则可引起一次肌肉收缩。
【动物与器材】
大白鼠或家兔、常用手术器械、手术台、二道生理记录仪、恒温平滑肌槽、不锈钢电极、铁锤、缝针、缝线、台氏液、肾上腺素(1∶10000)、乙酰胆碱(1∶100000)、阿托品。
【方法与步骤】
1.按图6-13连接仪器。引导电极与张力换能器分别连接二道生理记录仪两个前级放大器输入端。放大器灵敏度0.5-1mV/cm,时间常数2s,高频滤波15—30Hz,走纸速度1—2.5mm/s。装好一套恒温平滑肌槽。浴槽内盛约40ml室温台氏液,将充满空气的球胆经由橡皮管连至浴槽内的“L”型通气管上,调节橡皮管上的螺丝夹,使气泡大约以30-40个/min的速度进入浴槽,以供O2 。
2.手术取大白鼠或家兔一只,用铁锤猛击头部致昏迷后,迅速剖开腹腔。在十二指肠附近,取出一段10—12cm长的小肠,在室温台氏液中冲洗后,将其分为4段(作为4个样本)。在每段小肠的一端,用两根直径为0.10—0.15mm,末端裸露0.1mm的绝缘不锈钢丝,以与肠的纵轴垂直的方向插入浆膜下约3mm,用缝线将电极固定于浆膜层,以防脱落。两电极间距2mm。在肠段的两端用连线的蛙心夹夹住,一端连浴槽内的“L”型通气管上,距引导电极近的一端连张力换能器,以描记肠管的收缩运动。
3.实验观察
(1)记录肠段在室温台氏液中的电活动及收缩运动。
(2)将浴槽的台氏液温度逐渐升到37—38℃,记录电活动和收缩活动的变化。
(3)将台氏液的温度稳定于37℃,加乙酰胆碱(1∶100000)1—4滴于浴槽中,观察其变化。记录后用预先准备的37℃左右的新鲜台氏液更换,冲洗浴槽2—3次。
(4)肠段恢复正常活动后,滴加阿托品溶液2—3滴,观察其活动的变化。
(5)在上述基础上再迅速滴加乙酰胆碱(1∶100000)1—4滴,观察其变化(图6—14)。
(6)同法,用肾上腺素(1∶10000)滴加1—4滴,观察电活动和收缩活动的变化。
【注意事项】
1.在冲洗离体小肠标本时,要放在室温台氏液中进行,如放入温热(38℃)台氏液中冲洗,可使肠段活动抑制。
2.靠近小肠的一端缝电极,并使两电极部位的肠段露出液面,注意滴加台氏液,以保持其湿润。
3.引导电极的末端不要裸露过多,两引导电极间距不要太大,以免因引导电极同时记录到许多相邻的非同步的起搏细胞的电位变化而造成的幅度和波形的不规整。
4.标本最好在浴槽的台氏液中稳定5—10min后再开始描记。
5.浴槽内的台氏液温度应始终保持在37℃,并注意通气情况,以免缺O2 。
6.在实验过程中,可根据肠段活动的情况,适当增加药物剂量。