实验49 家兔在体小肠平滑肌电活动的描记
互联网
实验49 家兔在体小肠平滑肌电活动的描记
【目的要求】
1.学习在体小肠平滑肌电活动的记录方法。
2.观察电活动的波形。
【基本原理】
利用在体小肠浆膜上安放吸附电极的方法,可以引导出小肠平滑肌的电变化,包括平滑肌本身所具有的自发的周期性的基本电节律(慢波和其上的锋电位)快波(图6-11)。慢波出现时,并不一定引起肌肉收缩。当慢波超过临界水平,加上其它的影响因素,可以触发一个或多个动作电位,从而引起平滑肌的收缩。
随着动物的种类、肠段的部位以及安放电极的不同,引导出电活动的波形、频率有所差异。通常靠近口端的部位,其自发节律较快。
【动物与器材】
家兔、常用手术器械、手术台、二道生理记录仪、张力换能器、吸附电极、缝针、缝线、20%氨基甲酸乙酯溶液、温热生理盐水、乙酰胆碱(1∶1000)、阿托品。
【方法与步骤】
1.吸附电极的制作取直径0.9cm硬质塑料管一段,在酒精灯上软化后缓缓拉长,其细端直径为1—1.5mm。取长约5—10cm切断,其中包括5cm左右的粗端(图6-12左侧)。于粗细管交界处的粗端,由壁外插进一根细银丝(尖端圆钝),直插至离细口端1mm处。用塑胶或502胶将插孔封闭。注意:管壁不能漏气,否则难以吸附。最后在粗端加一个适宜的吸管头,便完成了吸附电极的制作。使用时,用手夹捏吸管头,细口端接触小肠浆膜,手放松后,细口端便吸附在肠壁上。
2.手术常规氨基甲酸乙酯(1g/kg体重)麻醉动物后,背位固定于手术台上。腹部剪毛,沿腹正中线切开皮肤,并沿腹白线剪开肌肉。将切口的腹壁四角用皮钳夹住并挂起成袋状。
在胸部正中近剑突软骨处缝一皮肤连线,接张力换能器,描记呼吸运动。
3.按图6—12连接仪器。记录仪的两前级放大器输入分别连两吸附电极和张力换能器,腹壁切口接地。接吸附电极的放大器参数:灵敏度2—0.5mV/cm,时间常数2s,滤波100Hz,走纸速度1-2.5mm/s。接张力换能器的放大器参数依照换能器敏感量程的大小而异,以显示清晰的呼吸波为准。一般时间常数取2s或直流,滤波10Hz。
4.固定吸附电极选择运动较明显的肠段,将电极对准吸附部位(沿小肠的纵轴方向)并吸附其上,两电极相距约1—2cm。注意:吸附部位需选择肠系膜对侧血管较少的肠段,并可用玻璃解剖针适当拨动肠管,或插入一弯玻璃棒于肠管间,固定一段小肠,以利于安放电极或观察肠管运动。
5.实验观察
(1)分别观察十二指肠、空肠与回肠的慢波与锋电位,并观察相应肠段的运动强度与节律。
(2)于肠段表面加一滴乙酰胆碱,观察电活动的频率、幅度与小肠运动的变化。
(3)于肠段表面加38℃生理盐水,观察其变化。
(4)于肠段表面滴加阿托品1—2滴,观察其变化。
【注意事项】
1.家兔小肠壁较薄,被吸附电极长时间吸附后,电位逐渐降低。实验中需适当地更换吸附部位。
2.平滑肌对温度极为敏感,整个实验应注意保温。