实验3 植物组织中自由水和束缚水含量的测定

实验3 植物组织中自由水和束缚水含量的测定

原理

　　植物组织中的水分是由被胶粒所因着的束缚水及不被胶粒所固着的自由水两部分所组成。束缚水不蒸发和结冰，不能作为溶剂，也不被浴质夺取，所以当植物组织被浸入较浓的糖溶液中脱水，一定时间后仍未被夺取的水分作为束缚水，而被夺取的水分作为自由水。自由水的量可根据所加糖液浓度的降低量来计算。再由植物组织的总含水量减去自由水量，即可求得束缚水量。

　　植物体内自由水和束缚水含量及其比值常与植物的生长及抗性有密切关系。自由水较多时，代谢活动常较强，生长速度也较快，但抗性往往降低；而束缚水含量多时，则情况相反。所以自由水与束缚水含量是植物抗性生理的一个指标。

仪器药品

　　阿贝氏折射仪 　　　分析天平

　　烘箱 　　　　　　　超级恒温水浴

　　直径5mm钻孔器　　 干燥器

　　滤纸　　　　　　　称量瓶

　　65─70%(W/V)蔗糖溶液 　　吸滤管、　　移液管

操作步骤

　　1．取称量瓶2个，洗净、烘干、称重后备用。

　　2．在田间选定待测作物，摘取在生长、部位、叶龄等较一致的叶片5─10片。

　　3．用直径5mm钻孔器，在叶子的半边钻下小圆片，每叶5片，放入1号称量瓶中，盖紧。然后在叶子的另半边的对称位置上同样钻下5个小圆片，放入2号称量瓶，盖紧。

　　4．1号称量瓶于105℃烘箱中烘干至恒重，以计算含水量%。

　　5．2号称量瓶中分析天平上称重，求得梓品鲜重W_f 。

　　6．用移涂管吸取5ml60%蔗糖溶液，加到2号称量瓶中，加盖后再在分析天平上称重，求得所加蔗糖溶液的重量B。小心摇动瓶中溶液，使与样品混合均匀，放在阴凉处4梍5小时，其间经常摇动。

　　7．在老师指导下，将折射仪与超级恒温水浴相边连，水浴温度调节到20℃。

　　8．用吸滤管（在玻管的一端塞上少许脱脂棉，另一端配上橡皮吸头）吸取2号瓶中上层透明的溶液少许，滴一滴在折射仪棱镜在毛玻璃上，旋紧棱镜，测定浸出液的含糖百分数B2。棱镜用蒸馏水清洗后，再用同样方法测得原来蔗糖溶液的含糖百分数B1。

　　9．计算：按下式计算植物样品中自由水含量%。

式中：β为自由水含量%

　　B为加入样品中蔗糖溶液的重量

　　B₁ 为原蔗糖溶液深度百分数

　　B₂ 为加样后糖溶液的浓度百分数

　　W_f 为植物样品鲜重

　　公式(1)系根据如下关系求得：

　　若A为样品中自由水重量

　　加样后糖溶液中自由水量为(B A)×(1－B₂ )

　　原来糖溶液中自由水量为B(1－B₁ )

　　则样品中自由水量A=(B A)(1－B₂ )－B(1－B₁ )

式(2)和式(1)完全相等。

　　求得自由水含量%后，即可根据下式求出束缚水含量%。

　　束缚水含量%=组织含水量%－组织中自由水%