微核检测技术

一、实验目的

学会利用所学知识，进行自主实验设计；了解染色体畸变的各种类型及原理，掌握利用微核检测技术监测环境污染的一般方法。

二、实验原理

微核（micronucleus, 简称MCN），也叫卫星核，是真核类生物细胞中的一种异常结构，是染色体畸变在间期细胞中的一种表现形式。微核往往是各种理化因子，如辐射、化学药剂对分裂细胞作用而产生的。在细胞间期，微核呈圆形或椭圆形，游离于主核之外，大小应在主核1/3以下。微核的折光率及细胞化学反应性质和主核一样，也具合成DNA的能力。一般认为微核是由有丝分裂后期丧失着丝粒的染色体断片产生的。有实验证明，整条染色体或几条染色体也能形成微核。这些断片或染色体在分裂过程中行动滞后，在分裂末期不能进入主核，便形成了主核之外的核块。当子细胞进入下一次分裂间期时，它们便浓缩成主核之外的小核，即形成了微核。

已经证实，微核率的大小是和作用因子的剂量或辐射累积效应呈正相关，这一点与染色体畸变的情况一样。所以许多人认为可用简易的周期微核计数来代替繁杂的中期畸变染色体计数。由于大量新的化合物的合成，原子能的应用，各种各样工业废物的排出等都存在污染环境的可能性，欲了解这些因素对机体潜在的遗传危害，需要有一套高度灵敏，技术简单易行的测试系统来监测环境的变化。只有真核类的测试系统更能直接推测诱变物质对人类或其它高等生物的遗传危害，在这方面，微核测试是一种比较理想的方法。目前国内外不少部门已把微核测试用于辐射损伤、辐射防护、化学诱变剂、新药试验、食品添加剂的安全评价，以及染色体遗传疾病和癌症前期诊断等各个方面。

三、实验材料

蚕豆（vicia faba, 2n＝12）干种子。

四、实验仪器及用具

显微镜、手动计数器、镊子、载玻片、盖玻片、烧杯、瓷盘、培养箱、分析天平、水浴锅、酒精灯、剪刀、解剖针、滤纸、铅笔、标签纸、胶水等。

五、药品和试剂

根据学生试验设计要求，提供相应的药品和试剂。

六、实验步骤

(一)实验设计

学生可选择不同的方法自行设计进行材料的诱变处理，并将试验设计交指导老师审核后进行试验操作。

(二)实验实施

学生根据实验设计独立进行实验实施。并撰写实验报告。

七、实验作业

产生微核的根尖细胞在分裂中期可能出现什么样的分裂图象？