支原体预防&去除试剂选购指南
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细胞培养（特别是传代细胞）被支原体污染是个世界性问题，在细胞培养中支原体感染发生率达到63%,只要有一个具有增殖能力的支原体就能引起培养体系的污染,支原体则像慢性毒药一般，杀细胞于无形中，据统计，超过25%的细胞系中感染了支原体，研究者又不能通过可视法对其进行检测，而且它对细胞的生长率影响较小，也不易引起注意，所以研究者并不知晓。
支原体污染发生后危害巨大，能改变细胞的DNA,RNA及蛋白表达，改变细胞、篡改数据，造成实验数据不准确、不稳定或每次实验都得出不同结论或相反的结论。支原体污染不除，实验结果势必或多或少产生偏差，故进行实验前，确定细胞为mycoplasma-free至关重要，实验结果之数据才有意义。
支原体污染一般来源于血清，实验仪器、培养基或其他试剂蔓延开来。怎样预防和去除支原体污染呢？一般只有三种抗生素(四环素，大环内脂和喹诺酮)能有效对付支原体。在低浓度时，这些抗生素不会产生耐药性，且对哺乳动物细胞的毒性较小。四环素和大环内酯能结合30S和50S核糖体亚基，从而抑制蛋白质合成，喹诺酮抑制DNA旋转酶。因此可以在细菌DNA复制及蛋白质合成两个层面上抑制细菌生长，明显增强除菌效果。
目前市场上有多个厂家提供支原体去除&预防试剂，包括GenDEPOT、Roch、Bioland、Invivogen、MP Biomedials等。
在选购和使用时，我们需要注意关键几点:首先，支原体的去除或者预防效果，细胞毒性大小；其次，试剂的抗菌谱，是否能去除多种支原体，是否可以同时去除细菌，真菌等；再次，要考虑操作使用是否方便，因为如果使用起来比较麻烦，首先是费时费力，另外可能会带来二次污染；第四，价格因素，找到物美价廉的产品才是王道。
美国GenDEPOT—Cellmaxin 和Cellmaxin Plus：首选
Cellmaxin是一种新型抗生素制剂，含有两种有效成分，即大环内脂类和喹诺酮类物质,可以在DNA复制及蛋白质合成两个层面上抑制支原体生长，明显增强除菌效果，两者共同作用，1-2周内可消除92%以上的支原体，抗性菌株小于2%。
喹诺酮可以自由的穿透哺乳动物细胞，可以同时除去游离形式的及真核细胞内部的支原体，这个特点保证了经过Cellmaxin处理的细胞不会被支原体感染细胞中释放出的支原体感染。因此可以避免除菌后细胞内支原体的反复感染，从而起到预防作用。
Cellmaxin 可以结合细菌的拓补异构酶IV部分，抑制细菌DNA合成，因而对细菌的污染同样有效，低浓度时对革兰氏阴性及阳性细菌均有抑制作用。
Cellmaxin Plus 是Cellmaxin 升级版，即在Cellmaxin的基础上添加了抗真菌成分，三效合一，有效的防治支原体、G-阴性菌、G+阳性菌和真菌，抗性范围更广，不需要额外添加青霉素、链霉素及氨苄霉素等。
Cellmaxin Plus 产品总量为6 x 1 ml(独立包装，每个1 ml),10.5 mg/ml.作用浓度低，性价比较高，使用方便，即拆即用型，直接加入培养基中。
10 μg/ml可有效处理大部分细菌菌株和部分支原体；一般 5-20 μg/ml处理细胞培养系统中的绝大多数支原体、细菌和真菌等，对正常真核细胞代谢不存在明显的毒副作用。
Roche—BM-Cyclin
BM-Cyclin包含泰妙菌素（BM-Cyclin 1）和二甲胺四环素（BM-Cyclin 2）两种成分，抑制支原体及细菌生长，高效去除培养细胞中已感染的支原体。适用于多种培养细胞，无明显副作用，又不影响细胞本身的代谢，而且处理过的细胞不会重新感染支原体。
BM-Cyclin 需要联合使用，作用周期长，持续2周可消除80%以上的支原体。不确定是是否可以同时预防支原体。
Biolnd—BIOMYC-1,BIOMYC-2,BIOMYC-3
BIOMYC-1基于抗生素泰妙菌素，由真菌pleurotus mutilus 产生。 BIOMYC-2基于二甲胺四环素，四环素衍生物。此两种抗生素溶液通常按先后联合使用2－3次循环约一周以上，可取得良好的效果。BIOMYC-3 基于抗生素环丙沙星，属于氟喹酮类。许多支原体被证明对BIOMYC-3敏感。处理周期14天，其间，每2－3天更换培养基。
BIOMYC-1 和BIOMYC-2联合使用，以及BIOMYC-3单独使用是两种不同的处理支原体污染的途径，对于不同种类的支原体污染可能会有不同的效果。这三种结合使用，覆盖了抗生素的三大类，能去除90%的支原体。是否可以预防支原体目前还不能确定。
Invivogen—Plasmocin™ prophylactic和Plasmocin™ treatment
Plasmocin抗生素包含了两个针对支原体的有效成分，能在2周之内杀死支原体。抗生素一方面作用于蛋白质合成。另外一个作用于DNA复制阶段。这两个作用机制只针对支原体，对许多细菌和真核细胞则没有影响。
Invivogen公司的Plasmocin 也是两种抗生素的混合物，即大环内脂类、喹诺酮类，PlasmocureTM是Plasmocin的新一代产品，能在极少数支原体对Plasmocin耐受的情况下发挥作用。
Plasmocin™有两种浓度包装，一种是25mg/ml的治疗性Plasmocin™，可以用来杀灭支原体；2.5 mg/ml的预防性Plasmocin™，可以预防正常培养细胞中支原体污染。
对于日常预防支原体污染，需要另选购Plasmocin prophylactic。
MP Biomedials—MRA
MRA具有很强的抑制支原体活性的能力，使用方便，作用周期1-2周，但价格昂贵。
综上所述：选购物美价廉的产品，解决您的关键难题-美国GenDEPOT—Cellmaxin首选。
